发明名称 |
一种人激肽释放酶及其编码基因和应用制备方法 |
摘要 |
本发明提供了一种人组织激肽释放酶-1(hK1)编码基因、表达纯化方式和活性检测方法,以及一种改良的毕赤酵母发酵BSM培养基。本发明优化后的人激肽释放酶-1编码基因如SEQ ID NO:1所示。该序列是针对毕赤酵母表达系统进行密码子优化得到的序列,与天然序列相比,其更利于hK1在毕赤酵母中表达;建立的荧光酶活测定方法操作简单,并可应用于高表达单克隆重组工程菌的筛选。此外,改良发酵BSM培养基可在不影响毕赤酵母生产的前提下,促进hK1蛋白的高效表达,且抑制宿主内源蛋白的表达,便于下游分离纯化。由此可见,本发明为hK1蛋白在毕赤酵母中的表达应用奠定了基础。 |
申请公布号 |
CN104745613B |
申请公布日期 |
2016.01.20 |
申请号 |
CN201310737079.1 |
申请日期 |
2013.12.27 |
申请人 |
江苏众红生物工程创药研究院有限公司;常州京森生物医药研究所有限公司 |
发明人 |
马永;王安良;范宇;孙芳;马骏;章成昌;徐春林;陈晨;王耀方 |
分类号 |
C12N15/57(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;C12Q1/37(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/57(2006.01)I |
代理机构 |
北京易正达专利代理有限责任公司 11518 |
代理人 |
路远 |
主权项 |
一种重组人激肽释放酶1的编码基因,其特征在于,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示,在其碱基序列之前还加有如SEQ ID NO:3 所示分泌信号肽。 |
地址 |
213022 江苏省常州市新北区黄河中路132号 |