一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法

摘要

一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法，步骤如下：1）配制乙酸铵缓冲溶液；2）烟草及烟草制品的干燥、粉碎；3）粉碎好的样品加入乙酸铵缓冲溶液，超声提取；4）提取完的样品室温高速离心，得第一上清液；5）在第一上清液中加入乙酸乙酯进行萃取净化后，离心得第二上清液；6）取第二上清液经氮气吹干、去离子水复溶，制得待测样品；7）通过LC-MS/MS对待测样品中含有的烟草特有亚硝胺进行检测。本发明的优点在于：样品前处理方法简单易行，利用乙酸铵缓冲溶液将烟草特有亚硝胺溶出，并通过乙酸乙酯液液萃取进行净化，除去了蛋白质和干扰物质，得到除杂后的精制样液，使得样品检测具有较高精确度，且提取效率高，操作简便、省时，试剂消耗量小。

主权项

一种LC‑MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：1）配制乙酸铵缓冲溶液，乙酸铵缓冲溶液的浓度为100 mM；2）烟草及烟草制品的干燥、粉碎，所述的烟草及烟草制品为速冻的新鲜烟叶；3）粉碎好的样品加入乙酸铵缓冲溶液，粉碎好的样品与乙酸铵缓冲溶液的质量g与体积ml比值介于1:40~1:20范围之间，超声提取，超声提取时间为30 min，功率为100 HZ；4）提取完的样品室温高速离心，得第一上清液；5）在所述第一上清液中加入乙酸乙酯进行萃取净化，乙酸乙酯和第一上清液的体积比为1:1；之后离心得第二上清液；6）取第二上清液经吹干、复溶，制得待测样品；7）采用LC‑MS/MS对待测样品中含有的烟草特有亚硝胺进行检测。