一种检测复烤烟品种混杂的方法

摘要

本发明涉及一种检测复烤烟品种混杂的方法。其技术方案是包括以下步骤：（1）复烤烟DNA的提取：（2）引物合成：（3）简单重复序列间多态性-聚合酶链式反应：用ISSR引物826或者ISSR引物856在待检测的复烤烟中进行ISSR-PCR；（4）比对标准图谱：将待检测的复烤烟ISSR-PCR电泳后的成像照片与标准指纹图谱进行条带比对，如果条带能够吻合即为相应的品种之一，如果不能吻合即为混杂品种，检测完毕。有益效果是：为复烤烟的鉴定与检测提供了方法，在其它复烤烟的实验过程中可以直接参考本实验所筛选得到的引物和相应的退火温度直接进行ISSR-PCR反应，进而得到相应品种的指纹图谱作为后续比对的标准谱带。

主权项

一种检测复烤烟品种混杂的方法，其特征是：包括以下步骤：（1）复烤烟DNA的提取：用DNeasy kit试剂盒提取DNA后在1.0%琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性，并用分光光度计检测DNA提取纯度及浓度；（2）引物合成：合成ISSR引物826和ISSR引物856，其中，ISSR引物826的引物序列：ACA CAC ACA CAC ACA CC；ISSR引物856的引物序列：ACA CAC ACA CAC ACA CYA，合成后，用ddH2O将引物溶解；（3）简单重复序列间多态性‑聚合酶链式反应，英文缩写为ISSR‑PCR：用ISSR引物826或者ISSR引物856在待检测的复烤烟中进行ISSR‑PCR；（4）比对标准图谱：将待检测的复烤烟ISSR‑PCR电泳后的成像照片与标准指纹图谱进行条带比对，如果条带能够吻合即为相应的品种之一，如果不能吻合即为混杂品种，检测完毕。