发明名称 |
一种辛德毕斯病毒XJ-160缺陷型复制子及其构建方法和应用 |
摘要 |
本发明提供一种辛德毕斯病毒XJ-160缺陷型复制子及其构建方法和应用,其构建包括:XJ-160病毒质粒型复制子载体pVa-XJ的构建;含报告基因的XJ-160质粒型复制子pVaXJ-EGFP和pVaXJ-GLUC的构建;XJ-160缺陷型复制子的构建:利用Acl I限制性内切酶分别单酶切pVaXJ-EGFP和pVaXJ-GLUC,构建非结构基因处存在1139个碱基缺失的缺陷型质粒pVaXJ-EGFPΔ和pVaXJ-GLUCΔ。本发明的机理是:由于非结构基因区域存在部分缺失,该缺陷型复制子导入细胞后报告基因不能正常大量表达,而当细胞中存在甲病毒感染时,病毒表达的非结构蛋白可以弥补并反式作用于缺陷型复制子导致报告基因的大量表达。本XJ-160缺陷型复制子能够检测多种甲病毒,对于非甲病毒无反应,特异性高;具有较高灵敏度,可以检测到1PFU的病毒;操作简单快速,所需仪器少;可持续性强,检测时不需杀死病毒,适于快速监别甲病毒。 |
申请公布号 |
CN102816781B |
申请公布日期 |
2016.01.20 |
申请号 |
CN201110156335.9 |
申请日期 |
2011.06.10 |
申请人 |
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
发明人 |
梁国栋;朱武洋;付士红 |
分类号 |
C12N15/63(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/02(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/63(2006.01)I |
代理机构 |
北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 |
代理人 |
郭佩兰 |
主权项 |
一种辛德毕斯病毒XJ‑160缺陷型复制子pVaXJ‑EGFP△,其特征在于:其序列为:<img file="FDA0000770882980000011.GIF" wi="1611" he="2519" /><img file="FDA0000770882980000021.GIF" wi="1611" he="2852" /><img file="FDA0000770882980000031.GIF" wi="1611" he="2851" /><img file="FDA0000770882980000041.GIF" wi="1635" he="2781" />其中:<img file="FDA0000770882980000051.GIF" wi="1054" he="460" />。 |
地址 |
100052 北京市西城区迎新街100号 |