一种从HE染色片提取残微核酸的方法

摘要

本发明公开了一种从HE染色片提取残微核酸的方法，先用低浓度盐酸乙醇作脱色剂对HE染色片进行脱色，再用草酸溶液进行漂白，然后再富集靶细胞进行核酸提取。与现有技术相比，本发明的方法，能够有效祛除碱性染料苏木素和酸性染料伊红，有效的减少了核酸在提取和保存过程中的降解，并富集检测所需的靶细胞，从而可以利用穿刺组织、细胞涂片（包括痰和尿）、胃肠镜等全部常规HE染色片进行残微的核酸提取及其后续的分子病理检测，具有很好的实用性，能够产生很好的经济效益和社会效应。

主权项

一种从HE染色片提取残微核酸的方法，其特征在于：先用低浓度盐酸乙醇作脱色剂对HE染色片进行脱色，然后用草酸水溶液漂白，再富集靶细胞，最后对富集的靶细胞进行核酸提取即可；具体步骤包括：(1)将HE染色片浸入二甲苯30min及以上，轻滑掉盖玻片并取出，继续浸泡HE染色片8～12h，更换入新二甲苯，充分祛除中性树胶，得细胞片；更换入新二甲苯，浸泡15～20min；(2)取出细胞片用无水乙醇浸泡10～20min，充分祛除二甲苯；更换入新无水乙醇，浸泡15min，然后依次进行95％乙醇浸泡10min；80％乙醇浸泡5min；70％乙醇浸泡2min；自来水洗2min；(3)用1％盐酸酒精苏木素脱色细胞片30min以上；(4)2％草酸水溶液浸泡细胞片3～10min；自来水稍洗，蒸馏水洗30min，富集细胞片上的靶细胞，并立即转到离心管内；(5)提取靶细胞核酸即可；操作全过程中，禁止细胞片裸露在空气中；所述的HE染色片为：从手术病理石蜡包埋组织、穿刺组织、胃肠镜活检以及细胞涂片中通过正常病理步骤切片、染色得到的HE染色片。