优质肉鸡肌苷酸与肌内脂肪含量相关基因聚合的选育方法

摘要

本发明公开了一种优质肉鸡肌苷酸与肌内脂肪含量相关基因聚合的选育方法，其包括以下步骤：以连续两个世代优质肉鸡基因组DNA为模版，在PCR条件下，利用三对引物分别扩增基因；根据琼脂糖凝胶电泳对第一引物、第二引物、第三引物扩增产物进行大小判定，然后采用DNA测序技术筛选到腺苷琥珀酸裂解酶基因外显子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶-5-氨基咪唑核苷酸合成酶-甘氨酰胺核苷酸转甲基酶基因5’非编码区，以及脂肪细胞脂肪酸结合蛋白基因内含子2共有三个碱基的突变；再利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对这三个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析。本发明实现优势基因型的有利聚合，同时能较全面的探寻鸡肉质风味性状的遗传机制。

主权项

一种优质肉鸡肌苷酸与肌内脂肪含量相关基因聚合的选育方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤一，以连续两个世代优质肉鸡基因组DNA为模版，在PCR条件下，利用第一引物、第二引物、第三引物，分别扩增ADSL、GARS‑AIRS‑GART、A‑FABP基因；步骤二，根据琼脂糖凝胶电泳对第一引物、第二引物、第三引物扩增产物进行大小判定，然后采用DNA测序技术筛选到腺苷琥珀酸裂解酶基因外显子9，甘氨酰胺核苷酸合成酶‑5‑氨基咪唑核苷酸合成酶‑甘氨酰胺核苷酸转甲基酶基因5’非编码区，以及脂肪细胞脂肪酸结合蛋白基因内含子2共有三个碱基的突变；所述腺苷琥珀酸裂解酶基因外显子9在10191bp存在C/T的突变，甘氨酰胺核苷酸合成酶‑5‑氨基咪唑核苷酸合成酶‑甘氨酰胺核苷酸转甲基酶基因5’非编码区在153bp存在C/T的突变，以及脂肪细胞脂肪酸结合蛋白基因内含子2在1684bp存在C/T的突变；步骤三，再利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对这三个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析优质肉鸡个体多态性与肌苷酸与肌内脂肪含量的关系及不同基因型组合与肌苷酸与肌内脂肪含量之间的关系，并上溯亲代，跟踪子代，检测优质肉鸡个体的基因型组合与肌苷酸与肌内脂肪含量的关系，分析不同基因型在肌苷酸与肌内脂肪含量性状形成中的贡献，挑选高肌苷酸与肌内脂肪含量个体的基因型组合，分析高肌苷酸与肌内脂肪含量个体基因型组合形成的选配方式，应用这些选配方式形成优质肉鸡高肌苷酸与肌内脂肪含量的多基因聚合核心群；所述第一引物如下：上游引物1F：5’‑TCTCCTTCCACAGGCTCAA‑3’；下游引物1R：5’‑AACTGCTGCACTGCACGAT‑3’；所述第二引物P2如下：上游引物2F：5’‑ACAGTTGCCAGTCTGATTA‑3’；下游引物2R：5’‑CATCGCCAGAGTTAGAAGT‑3’；所述第三引物P3如下：上游引物3F：5’‑GGAATGTGACAACGCTAA‑3’；下游引物3R：5’‑CGGATAAGGAGGGCAGAG‑3’；所述第一引物扩增腺苷琥珀酸裂解酶基因外显子9，用于筛选优质肉鸡腺苷琥珀酸裂解酶基因位点的突变，第二引物扩增甘氨酰胺核苷酸合成酶‑5‑氨基咪唑核苷酸合成酶‑甘氨酰胺核苷酸转甲基酶基因5’非编码区，用于筛选优质肉鸡甘氨酰胺核苷酸合成酶‑5‑氨基咪唑核苷酸合成酶‑甘氨酰胺核苷酸转甲基酶基因位点的突变，第三引物扩增脂肪细胞脂肪酸结合蛋白基因内含子2，用于筛选优质肉鸡脂肪细胞脂肪酸结合蛋白基因位点的突变。