HPLC-DAD法同时测定四物汤煎剂中10种化学成分含量的方法

摘要

本发明涉及一种HPLC-DAD法同时测定四物汤中10种化学成分含量的方法。属于中药成分分析领域。其步骤如下：(1)混合对照品溶液的配制。(2)供试品溶液的配制。(3)测定法：采用HPLC-DAD法测定混合对照品及供试品的浓度。色谱条件：色谱柱：elit C18(250mm×4.6mm，5μm)；检测波长：280nm；流速：0.8mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL；梯度洗脱条件：0～2.0min，体积分数为2％的甲醇等度洗脱，2.0～15.0min线性增加至20％的甲醇，15.0～25.0min为体积分数20％的甲醇等度洗脱，25.0～42.0min线性增加至100％的甲醇，42.0～45.0min为100％的甲醇等度洗脱。本发明所建立同时测定四物汤煎剂中10种化学成分的分析方法简单方便、重复性好，准确可靠，可为四物汤煎剂质量控制提供依据。

主权项

一种使用HPLC‑DAD同时测定四物汤煎剂中10种化学成分含量的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)混合对照品溶液的配制：分别精密称取没食子酸，5‑羟甲基糠醛，儿茶素，白芍苷，芍药苷，阿魏酸，毛蕊花糖苷，洋川芎内酯I，洋川芎内酯A，z‑藁本内酯对照品适量，加甲醇溶解稀释，摇匀，得到浓度分别为182.00，64.40，239.00，789.00，357.00，136.00，17.00，61.00，78.00，158.50，123.20μg·mL^‑1的混合对照品溶液；(2)供试品溶液的配制：按照四物汤的比例，分别精密称取熟地15g，当归10g，白芍10g，川芎6g，于煎药锅中，先加8倍量的水，浸泡1h，武火煮沸后，文火保持微沸状态煎煮30min，以四层纱布滤出药液，药渣再加5倍量的水武火煮沸后，文火保持微沸状态煎煮20min，四层纱布滤出药液，合并两次煎液，浓缩到300mL，用移液管精密移取4.0mL药液与6.0mL甲醇于锥形瓶中，称定重量，超声30分钟，用60％的甲醇补足减失重量，4500r/min，高速离心10min，吸取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；测定法：采用HPLC‑DAD法测定混合对照品及10批供试品的浓度，应用的色谱条件：色谱柱：elit C₁₈：250mm×4.6mm，5μm；检测波长：280nm；流速：0.8mL·min^‑1；柱温：30℃；进样量：20μL；梯度洗脱条件：流动相为0.3％甲酸水溶液与甲醇的混合物，0～2.0min，体积分数为2％的甲醇等度洗脱，其余98％为0.3％甲酸水溶液，2.0～15.0min线性增加至20％的甲醇，0.3％甲酸水溶液线性减少到80％，15.0～25.0min为体积分数20％的甲醇等度洗脱，其余80％为0.3％甲酸水溶液，25.0～42.0min线性增加至100％的甲醇，0.3％甲酸水溶液线性减少到0，42.0～45.0min为100％的甲醇等度洗脱。