基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法

摘要

本发明公开了一种基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法，即通过腺病毒载体转大鼠OPN基因从而达到体外促进大鼠原代肝细胞增殖的方法，包括步骤：（1）大鼠OPN基因的获得；（2）重组腺病毒载体的构建；（3）腺病毒的包装与扩增；（4）大鼠原代肝细胞的分离与培养；（5）腺病毒对大鼠原代肝细胞的体外侵染。本发明提供的方法成本低廉，操作简单，并且能够达到很好的促肝细胞体外增殖的效果。

主权项

基于转OPN基因诱导的肝细胞体外增殖方法，其特征在于通过腺病毒载体将大鼠OPN基因导入大鼠原代肝细胞中诱导大鼠肝细胞的体外增殖，其中大鼠OPN基因序列为：atgagactgg cagtggtttg cttttgcctg ttcggccttg cctcctgtct cccggtgaaa  60gtggctgagt ttggcagctc ggaggagaag gcgcattaca gcaaacactc agatgctgta  120gccacttggc tgaagcctga cccatctcag aagcagaatc ttctagcccc acagaattct  180gtgtcctctg aagaaacgga tgactttaag caagaaactc ttccaagcaa ctccaatgaa  240agccatgacc acatggacga tgatgacgac gacgatgacg atggagacca tgcagagagc  300gaggattctg tgaactcgga tgaatctgac gaatctcacc attccgatga atctgatgag  360tccttcactg ccagcacaca agcagacgtt ttgactccaa tcgcccccac agtcgatgtc  420cctgacggcc gaggtgatag cttggcttat ggactgaggt caaagtccag gagtttccct  480gtttctgatg aacagtatcc cgatgccaca gatgaggacc tcacctcccg catgaagagc  540caggagtccg atgaggctct caaggtcatc ccagttgccc agcgtctgag cgtgccctct  600gatcaggaca gcaacgggaa gaccagccat gagtcaagtc agctggatga accaagcgtg  660gaaacacaca gcctggagca gtccaaggag tataagcaga gggccagcca cgagagcact  720gagcagtcgg atgcgatcga tagtgccgag aagccggatg caatcgatag tgcggagcgg  780tcggatgcta tcgacagtca ggcgagttcc aaagccagcc tggaacatca gagccacgag  840tttcacagcc atgaggacaa gctagtccta gaccctaaga gtaaggaaga tgataggtat  900ctgaaattcc gcatttctca tgaattagag agttcatctt ctgaggtcaa ttaa  954。