一种防治褐飞虱的混合配方制剂制备方法

摘要

本发明涉及生物防治技术领域，特别是涉及一种脐孢木霉菌（Trichoderma brevicompactum）0248代谢产物和吡虫啉混合配方制剂。本发明所述的脐孢木霉菌，定名为脐孢木霉菌0248。该菌株已在微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期2012年12月12日，保藏登记号CGMCC No.6985。本发明所述的脐孢木霉菌0248，经发酵提取可获得对褐飞虱类酵母共生菌具有抑制作用的代谢产物。本发明最显著的特征是将脐孢木霉菌0248代谢产物和常规杀虫剂吡虫啉按照一定的比例混合制备成新的配方，用这混合配方防治褐飞虱可以明显减少杀虫剂的使用量，有效提高褐飞虱的防治效果，延缓褐飞虱抗药性的发展。

主权项

一种防治褐飞虱的混合配方制剂制备方法，这种混合配方制剂包含脐孢木霉菌（Trichoderma brevicompactum）0248代谢产物和吡虫啉药液，所述脐孢木霉菌0248代谢产物和0.01g/L吡虫啉药液的体积比为1:1‑2:1；所述混合配方制剂由以下方法获得：(1)菌种的活化培养：将分离保存的脐孢木霉菌0248菌种移至马铃薯葡萄糖培养基平板上，在28℃±1℃条件下，培养至培养皿长满绿色孢子，加入10ml无菌水，用涂布棒轻轻刮，洗下的孢子液用无菌滤纸过滤，得到孢子悬液，并用血细胞计数板计数使孢子悬液浓度为1.0×10⁶个/ml；所述的脐孢木霉菌0248已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期2012年12月12日，保藏登记号CGMCC No. 6985； (2)发酵培养：发酵培养液为每1000ml中含有葡萄糖8g，牛肉膏10g，NaCl 2g，每300ml三角瓶装发酵培养液60ml；配制后立即121℃灭菌20min，待冷却至40℃在无菌条件下接种浓度为1.0×10⁶个/ml的孢子悬液1ml，在 28℃±2℃条件下，培养3天； (3)发酵代谢产物收集：发酵完毕，离心，弃菌丝体，收集发酵液，此发酵液即为脐孢木霉菌0248代谢产物； (4)混合配方配制：将脐孢木霉菌0248代谢产物和0.01g/L吡虫啉药液按1:1‑2:1体积比混合，即得混合配方，用于褐飞虱防治。