DNA的硅珠直扩检验方法

摘要

本发明公开了一种在案件中微量及常量生物检材的DNA的硅珠直扩检验方法。它包括以下步骤：步骤A：采用硅珠法提取DNA，使DNA释放到液体中后，去除载体，保留液体；步骤B：将上一步骤获得的液体移到PCR扩增板中，使硅珠悬浮；步骤C：使硅珠附着在PCR扩增板的板孔内；硅珠保留在管底；步骤D：用乙醇清洗硅珠；步骤E：采用ID-PLUS试剂扩增；步骤F：按11微升体系常规做PCR扩增；步骤G：扩增结束后，加入纯水后取产物上机检测。采用上述方法后，不但对各类检材的适应性好，检验省时省力，而且将案件现场微量生物检材的检出率提高2倍以上，有很高的实际运用价值。

主权项

一种DNA的硅珠直扩检验方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤A：将包含低于3纳克DNA含量的检材放入孔板中，采用硅珠法提取DNA， DNA提取过程中，孔板的每孔中加入裂解液160‑180微升，1摩尔浓度的DTT10‑20微升，使DNA释放到液体中后，去除载体，保留液体；步骤B：另取一块PCR扩增板，PCR扩增板的每孔中加入5‑6微升硅珠液体，将上一步骤获得的液体移到PCR扩增板中，并使硅珠悬浮；步骤C：将PCR扩增板盖上胶盖，放置于4摄氏度的温度环境中30分钟以上；取出PCR扩增板用平板离心机进行离心处理，使硅珠附着在PCR扩增板的板孔内；取出后将PCR扩增板翻转过来，轻甩两次以上，将液体甩弃，硅珠保留在管底；步骤D：使用冷乙醇清洗硅珠，去除杂质，再干燥硅珠；步骤E：采用常规扩增液和扩增方法进行扩增，每孔中加入扩增混合液，同时用移液器吹打使硅珠悬浮；步骤F：将PCR扩增板盖上胶盖，按常规方法做PCR扩增；步骤G：扩增结束后，PCR扩增板的每孔中加入纯水，放入平板离心机中瞬时离心，每孔取适量产物上机检测。