发明名称 |
人NEFL基因rs1059111位点多态性检测方法及试剂盒 |
摘要 |
人NEFL基因rs1059111位点多态性检测方法及试剂盒。该方法包括:提供待测人基因组DNA;提供扩增人NEFL基因rs1059111位点附近序列的上游引物和下游引物,其中下游引物具有错配碱基C;以所述待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含GWCGAC片段的扩增产物,或含WCGA的扩增产物,其中W为人NEFL基因rs1059111位点上的待定碱基A或T;提供限制性内切酶;利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物;以及根据所得酶切产物来确定人NEFL基因rs1059111位点上的待定碱基W是A还是T。限制性内切酶为仅能够切开GTCGAC片段与GACGAC片段之一的限制性内切酶,或为仅能够切开TCGA或ACGA片段之一的限制性内切酶。该测定手段不但快速可靠,而且测定成本大大降低。 |
申请公布号 |
CN105256012A |
申请公布日期 |
2016.01.20 |
申请号 |
CN201510618709.2 |
申请日期 |
2015.09.24 |
申请人 |
河南省职业病防治研究院 |
发明人 |
王思华;余善法;肖庆峰;秦文华;王喜爱 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 |
代理人 |
张群峰;吕良 |
主权项 |
一种测定人NEFL基因rs1059111位点多态性的方法,包括:提供待测人基因组DNA;提供扩增人NEFL基因rs1059111位点附近序列的上游引物和下游引物,其中下游引物具有错配碱基C;以所述待测人基因组DNA为模板,利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含GWCGAC片段或WCGA片段的扩增产物,其中W为人NEFL基因rs1059111位点上的待定碱基A或T;提供限制性内切酶;利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物;以及根据所得酶切产物来确定人NEFL基因rs1059111位点上的待定碱基W是A还是T,其中,限制性内切酶为仅能够切开GTCGAC片段与GACGAC片段之一的限制性内切酶,或为仅能够切开TCGA或ACGA片段之一的限制性内切酶。 |
地址 |
450000 河南省郑州市康复中街3号 |