发明名称 |
卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中IL-8表达的检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中IL-8表达的检测方法,包括:步骤1,以pGL6为质粒载体,构建含有IL-8启动子的质粒;步骤2,将步骤1所得质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中,得到IL-8-promotor-pGL6-16HBE细胞;步骤3,在步骤2所得细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物,作用至少48h;步骤4,对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测,依据所得的荧光素酶活性,得到上皮细胞中IL-8的诱导表达倍数。本发明提供的检测方法,操作简单,方便快速,灵敏度高,能够准确检测卷烟主流烟气中芳香胺类物质对人气道上皮细胞中IL-8表达的诱导作用。 |
申请公布号 |
CN105238850A |
申请公布日期 |
2016.01.13 |
申请号 |
CN201510727571.X |
申请日期 |
2015.10.30 |
申请人 |
浙江中烟工业有限责任公司 |
发明人 |
周国俊;储国海;肖卫强;卢昕博;沈凯;夏倩;胡雅军;许成云;吴希美 |
分类号 |
C12Q1/66(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/66(2006.01)I |
代理机构 |
杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 |
代理人 |
刘静静 |
主权项 |
一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中IL‑8表达的检测方法,其特征在于,包括:步骤1,以pGL6为质粒载体,构建含有IL‑8启动子的IL‑8‑promotor‑pGL6质粒;步骤2,将IL‑8‑promotor‑pGL6质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中,得到IL‑8‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞;步骤3,在IL‑8‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物,作用至少48h;步骤4,对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测,依据所得的荧光素酶活性,得到上皮细胞中IL‑8的诱导表达倍数。 |
地址 |
310009 浙江省杭州市上城区建国南路288号 |