发明名称 | 一种提取棉花基因组DNA的方法 | ||
摘要 | 一种提取棉花基因组DNA的方法,步骤为:①、取棉花种子水浴,然后进行浸种、催芽;②、取下步骤①中经过催芽的种子的下胚轴,将下胚轴移至离心管中研磨匀浆后,在装有下胚轴的离心管中依次加入2%CTAB缓冲液、异戊醇;③、将步骤②添加有试剂的离心管震荡后离心,去杂质;④、将步骤③离心管中的下清液取出转入另一离心管中离心,沉淀DNA,然后倒掉离心管内液体;⑤、取步骤④中沉淀的DNA干燥后加入灭菌的双蒸水或1×TE缓冲液,溶解后即得DNA模板。其优点是:将种子催芽后取下胚轴顶端进行基因组DNA提取,催芽时间短、杂质少、简便、且成功率高;仅使用2%CTAB缓冲液和异戊醇两种溶液,省试剂且低毒、污染少。 | ||
申请公布号 | CN105238775A | 申请公布日期 | 2016.01.13 |
申请号 | CN201510568394.5 | 申请日期 | 2015.09.08 |
申请人 | 长江大学 | 发明人 | 张文英;刘晓雪;王国荣;徐延浩 |
分类号 | C12N15/10(2006.01)I | 主分类号 | C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 | 武汉河山金堂专利事务所(普通合伙) 42212 | 代理人 | 胡清堂 |
主权项 | 一种提取棉花基因组DNA的方法,其特征在于:按照以下步骤进行:①、取棉花种子于恒温水浴锅中水浴,然后取出水浴后的种子进行浸种、催芽;②、取下步骤①中经过催芽的种子的下胚轴,将下胚轴移至离心管中研磨匀浆后,在每个装有下胚轴的离心管中依次加入400‑600μl 2%CTAB缓冲液、400‑600μl异戊醇;③、将步骤②添加有试剂的离心管震荡后离心,去杂质;④、将步骤③离心管中的下清液取出转入另一离心管中离心,沉淀DNA,然后倒掉离心管内液体;⑤、取步骤④中沉淀的DNA进行干燥后加入100μl灭菌的双蒸水或1×TE缓冲液,溶解后即得DNA模板。 | ||
地址 | 434023 湖北省荆州市南环路1号 |