发明名称 奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒
摘要 本发明涉及一种奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒,包括检测产肠毒素大肠杆菌LT基因、产肠毒素性大肠杆菌ST基因、沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、单核细胞增生性李氏杆菌hlyA基因的五对引物。本发明以规模化牛场环境中常见的大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李氏杆菌为研究对象,利用这些致病菌不同的靶基因建立特异性强、可靠性和灵敏度高的多重PCR反应试剂盒,这不仅可以提高检测的灵敏度和准确性,且能够检测到一些传统方法很难检测到的致病菌,还为快速、高效检测和控制牛场环境中多种致病菌提供思路和方法。
申请公布号 CN104152555B 申请公布日期 2016.01.13
申请号 CN201410384616.3 申请日期 2014.08.07
申请人 黑龙江八一农垦大学 发明人 杨玉英;胡婧;翟军军;孙海英
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/14(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N;C12R1/42(2006.01)N;C12R1/01(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 大庆市建华专利事务所 23119 代理人 孙薇
主权项 一种奶牛致病菌五重PCR反应试剂盒,包括10×PCR反应缓冲液,Mg<sup>2+</sup>,dNTP,引物和Taq酶,其特征在于:所述的引物为:(1)检测产肠毒素性大肠杆菌LT基因的引物:F1:5′‑CTGACTCTAGACCCCCAGATGAAAT‑3′(SEQ ID No.1)R1:5′‑CTGTCCTGCTAAGTGAGCACTTCTC‑3′(SEQ ID No.2)(2)检测产肠毒素性大肠杆菌ST基因的引物:F2:5′‑AAAACCAGATAGCCAGACAATTAAC‑3′(SEQ ID No.3)R2:5′‑AGGATTACAACAAAGTTCACAGCAG‑3′(SEQ ID No.4)(3)检测沙门氏菌invA基因的引物:F3:5′‑GATTTGTCCTCCGCTCTGTCTACTT‑3′(SEQ ID No.5)R3:5′‑CAATACGATGCTGTTATCGTCCAGG‑3′(SEQ ID No.6)(4)检测金黄色葡萄球菌nuc基因的引物:F4:5′‑TAGGGATGGCTATCAGTAATGTTTC‑3′(SEQ ID No.7)R4:5′‑CCATCAGCATAAATATACGCTAAGC‑3′(SEQ ID No.8)(5)检测单核细胞增生性李氏杆菌hlyA基因的引物:F5:5′‑TATGATGACGAAATGGCTTACAGTG‑3′(SEQ ID No.9)R5:5′‑GAACAATTTCGTTACCTTCAGGATC‑3′(SEQ ID No.10)。
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