一种用废糖蜜和地沟油双碳源发酵生产槐糖脂的方法

摘要

本发明公开了一种用废糖蜜和地沟油双碳源发酵生产槐糖脂的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（1）将球拟酵母菌接种到YPD斜面培养基上制菌悬液（2）制种子液（3）将种子液接种于以废糖蜜和地沟油为底物的发酵培养基中发酵（4）乙酸乙酯提取槐糖脂。本发明实现废弃物的资源化利用，大大降低了槐糖脂的生产成本。解决了地沟油排放污染大、再次进入食用领域危害大的问题，实现了地沟油资源的合理化利用。该工艺不需要复杂的设备，而且发酵过程简单易行，有利于槐糖脂的开发、应用和推广。

主权项

一种用废糖蜜和地沟油双碳源发酵生产槐糖脂的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)菌悬液的制备：将球拟酵母菌ATCC 22214接种到由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉和琼脂组成的YPD斜面培养基上，用蒸馏水定容至1L，pH＝6.0；于30℃恒温培养2‑3天，用适量质量浓度为0.85％的生理盐水洗脱菌体，制得菌悬液；斜面培养基组成(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨20，酵母粉10，琼脂15‑20；菌悬液中菌细胞含量为10⁷‑10⁸个/mL；(2)制种子液：将由葡萄糖、酵母粉和尿素组成的种子培养基100ml置于500ml的摇瓶中，121℃灭菌20min，冷却后按照体积百分比3‑5％的接种量接入上述菌悬液，然后将摇瓶置于25‑32℃、120‑180rpm的摇床上培养24h，得到种子液；种子培养基组成(g/L)：葡萄糖60‑100，酵母粉5‑8，尿素0.5‑1；(3)发酵：将上述种子液用于接种无菌的5L发酵罐以废糖蜜和地沟油为底物的发酵培养基中，用自来水定容至3L，pH＝6.0，将发酵培养基于121℃灭菌20min，冷却后将上述种子液接入发酵培养基中，保持发酵温度25‑32℃，溶氧20‑60％，进行发酵；发酵培养基组成(g/L)：地沟油60‑120，废糖蜜60‑180，酵母粉3‑5；(4)制槐糖脂：发酵结束后，用与发酵液等体积的有机溶剂乙酸乙酯提取槐糖脂，减压蒸馏除去有机溶剂，得到槐糖脂。