发明名称 |
一种用于微生物的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种用于微生物的CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建及其应用。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体,包括复制起始位点、筛选标记基因、Cas9蛋白基因、gRNA的编码DNA、同源重组元件和操纵子。本发明构建的CRISPR/Cas9基因载体能够对大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌基因组进行编辑(包括基因或者DNA序列的敲除、置换、插入等操作),具有试验周期短、节省时间和成本、效率高等优点。 |
申请公布号 |
CN105238806A |
申请公布日期 |
2016.01.13 |
申请号 |
CN201510732830.8 |
申请日期 |
2015.11.02 |
申请人 |
中国科学院天津工业生物技术研究所 |
发明人 |
毕昌昊;张学礼;赵东东 |
分类号 |
C12N15/70(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 |
代理人 |
关畅;任凤华 |
主权项 |
载体,包括复制起始位点、筛选标记基因、Cas9蛋白基因和gRNA的编码DNA,所述gRNA识别受体菌的目的DNA,所述受体菌的目的DNA具有5’‑(N)<sub>X</sub>‑NGG‑3’结构,(N)<sub>X</sub>表示X个N,N为A、G、C或T,X为大于5的一个自然数;其特征在于:所述载体包括同源重组元件和操纵子;所述同源重组元件含有用于进行同源重组的DNA片段,所述同源重组元件通过与所述受体菌的基因组DNA靶位点附近发生同源重组从而实现所述靶位点的基因组编辑;所述操纵子调控所述Cas9蛋白基因的转录,或调控所述Cas9蛋白基因和所述gRNA的编码DNA的转录。 |
地址 |
300308 天津市滨海新区空港经济区西七道32号 |