一种从石斛中提取毛兰素的方法

摘要

本发明公开了一种从石斛中提取毛兰素的方法，该方法包括应用碱性有机溶剂提取、非水相有机溶剂混合萃取、小孔径树脂分离、有机溶剂结晶等工艺,制备得到高纯度毛蓝素方晶，与现有的有工艺方法相比，具有工艺简单、粗提溶剂成本低、目标物非水相萃取杂质少、柱层析陈本低、填料分离精度高可反复利用，层析溶剂陈本低、对环境污染相对较轻、毛兰素得率高、纯度高等优点，适合工业化生产。

主权项

一种从石斛中提取毛兰素的方法，其特征在于按如下步骤进行：（1）取干燥石斛全株粉碎至粒度为40‑60目；（2）石斛粉末用pH=8‑10的甲醇溶液回流提取3次，提取温度为75‑80℃，其中第一次回流提取2‑3h，第二次提取1.5‑2h，第三次提取0.5‑1h，合并三次提取液，回收甲醇得到粗提物；（3）用乙腈超声溶解粗提物，过滤，不溶残渣再使用乙腈溶解一次过滤，合并乙腈溶解液，备用；（4）按体积比1:1‑1:2的比例，在乙腈溶解液中加入石油醚二氯甲烷混合溶液或者环己烷二氯甲烷混合溶液萃取，静置分层后取上层液，下层液再萃取分层，重复2‑3次，合并上层液，下层液经薄层鉴别无毛兰素斑点后丢弃，上层液浓缩得到油性膏状物；（5）采用新配置的pH=10的甲醇溶液回流提取油性膏状物3次，温度60‑80℃，合并三次提取液，用盐酸调节提取液pH=6后，静置24后过滤，即得到含有毛蓝素的沉淀，含有毛蓝素的沉淀物用甲醇、乙醇或丙醇溶解制备成上样溶液备用；（6）取小孔径分离树脂加压装柱，用体积百分比浓度为35‑50%的甲醇、乙醇或丙酮水溶液平衡柱子，然后将上样样品溶液缓慢滴加上样，上样完毕静置1‑1.5h后用体积百分比浓度为40‑60%甲醇、乙醇或丙酮水溶液加压洗脱，薄层鉴别收集毛兰素段洗脱液，浓缩回收溶剂，最后用石油醚冰乙酸混合溶液、石油醚丙酮混合溶液或丙酮结晶2次，固体干燥即得到毛兰素；其中步骤（2）中pH=8‑10的甲醇溶液是指用碳酸氢钠、氢氧化钠或氨水调节质量百分比浓度为50‑70%的甲醇溶液的pH为8‑10而制得；所述步骤（6）中小孔径分离树脂为MCI树脂、树脂Chroma‑R204或树脂PRP5。