高效分泌表达黑曲霉α-半乳糖苷酶AGA的工程菌及其构建和应用

摘要

本发明属于生物技术和基因工程领域，涉及两株高效分泌表达黑曲霉α-半乳糖苷酶AGA的毕赤酵母工程菌及其构建方法。本发明将经过密码子优化及信号肽Kex2酶切位点优化的重组黑曲霉α-半乳糖苷酶AGA在巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)基因工程菌中异源分泌表达，提高了α-半乳糖苷酶AGA的分泌表达量。一株菌QIBEBT-AGA-I，甲醇诱导发酵72h，胞外酶活可达1244U/mL；另一株菌QIBEBT-AGA-P，甲醇诱导发酵120h，胞外酶活可达1340U/mL。两株菌的胞外α-半乳糖苷酶产量均高于普通工程菌株产量。本发明有助于降低黑曲霉α-半乳糖苷酶AGA的工业化生产成本，因此具有大规模工业发酵，商业化生产α-半乳糖苷酶的潜力和价值。

主权项

一种α‑半乳糖苷酶AGA的毕赤酵母密码子优化序列，其特征在于：毕赤酵母密码子优化序列reAGA为SEQ ID NO:1所示。