酵母菌转化异丁香酚生产香兰素的方法

摘要

本发明公开了一种酵母菌转化异丁香酚生产香兰素的方法，包括：S1、构建用于生产异丁香酚单加氧酶的酵母菌；S2、将构建的所述酵母菌接种至YPD液体培养基中振荡培养；S3、离心收集菌体，生理盐水洗涤，转入MGY液体培养基中振荡培养；S4、离心收集菌体，生理盐水洗涤，转入MM液体培养基中使OD600>6，振荡培养3-5天；每天补加甲醇，并用氨水调节pH，得到发酵液；选择性地将所述发酵液离心以收集上清液；S5、按异丁香酚：所述上清液或所述发酵液：缓冲液＝0.1-0.6g：9-18mL：9-18mL加入反应容器中，在20-30℃下振摇转化12-48h，得到香兰素。本发明实现采用酵母菌工业化生产香兰素，适用于食品领域等，满足需求，安全。

主权项

一种酵母菌转化异丁香酚生产香兰素的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、构建用于生产异丁香酚单加氧酶的酵母菌；S2、将构建的所述酵母菌接种至YPD 液体培养基中，于30‑35℃振荡培养18‑36小时；S3、离心收集菌体，生理盐水洗涤，转入MGY液体培养基中；于30‑35℃振荡培养36‑60小时；S4、离心收集菌体，生理盐水洗涤，转入MM液体培养基中使OD600>6，于30‑35℃振荡培养3‑5天；每天补加甲醇，并用氨水调节pH，得到发酵液；选择性地将所述发酵液离心以收集上清液；S5、按异丁香酚：发酵液或上清液：缓冲液=0.1‑0.6g ：9‑18 mL：9‑18 mL加入反应容器中，在20‑30℃下振摇转化12‑48h，得到香兰素；所述缓冲液为pH8‑10.4的甘氨酸的NaOH水溶液。