抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂及其制备方法

摘要

本发明公开了一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂及其制备方法，利用纤维素酶活性高、同时能够抑制芦蒿连作土壤中丝核菌、镰刀菌等土传病原菌的枯草芽孢杆菌菌株和里氏木霉菌株，生产芦蒿秸秆分解菌剂。该菌剂能够加速芦蒿连作土壤中芦蒿秸秆残茬的分解速度，同时抑制秸秆残茬上病原微生物的繁殖增生，降低芦蒿连作障碍的危害。菌剂中功能微生物数量≧2×10⁸cfu•g^-1，含水量小于15%，有机质含量大于35%。试验表明，芦蒿连作障碍发病严重地块，施用芦蒿秸秆残茬分解菌剂后，相较于不使用分解菌剂土壤，芦蒿秸秆分解失重率提高80.9%，下茬芦蒿发病率降低75%，芦蒿产量增116%；该秸秆分解菌剂能够很好的抑制芦蒿的连作病害。

主权项

一种抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂，其特征在于：所述芦蒿秸秆分解菌剂为枯草芽孢杆菌D9（Bacillus subtilis D9）和里氏木霉（Trichoderma reesei）菌株通过发酵工艺生产，产品有效菌落形成单位（cfu）≥2×10⁸ cfu•g^‑1，含水量<15%；所述枯草芽孢杆菌D9于2014年5月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌株保藏号为CGMCC NO.9170；所述的枯草芽孢杆菌D9（保藏号CGMCC NO.9170）的主要生物学特性为：菌落为白色、边缘不整齐、表面干燥不透明，革兰氏染色阳性，具运动性，通过电镜观察，杆状，芽孢中生，两端钝圆；所述芦蒿秸秆分解菌剂的制备方法如下：1）将里氏木霉接种到木霉液体培养基，进行液体发酵生产里氏木霉发酵液，其发酵生产的条件为：培养温度25‑30℃，溶氧通气量范围为30～100％，110‑170rpm，发酵后期菌丝球全部打碎成菌丝片段，里氏木霉发酵液菌株的菌落形成单位≥0.5×10⁸cfu•ml^‑1；2）将稻壳、秸秆粉和麦麸按照30：40：30比例混合，按照1:1.2‑1.5的比例添加水，121℃灭菌30min，制成木霉固体发酵培养基，冷却到室温后按照10%的接种量接种里氏木霉发酵液，20‑25℃培养30天，每3‑5天翻动固体发酵培养基，发酵结束形成里氏木霉固体发酵菌种；3）将枯草芽孢杆菌D9接种到液体发酵培养基制得枯草芽孢杆菌发酵液，其发酵生产的条件为：初始pH范围为6.5‑7.2，培养温度35‑37℃，溶氧通气量范围为30～100％，120‑180rpm，发酵18h，枯草芽孢杆菌发酵液中芽孢数量≥2×10⁸cfu•ml^‑1； 4）将制得的枯草芽孢杆菌发酵液按照10%比例接种到固体发酵培养基，发酵温度为37℃，发酵培养时间为5天，发酵过程中每10‑20小时翻动一次，发酵结束获得枯草芽孢杆菌D9固体发酵菌种；5）将里氏木霉固体发酵菌种和枯草芽孢杆菌D9菌固体发酵菌种按照1:1质量比彻底的混合，用粉碎机粉碎，按照30%质量比添加粉碎碳酸钙粉，彻底混匀，基质含水量低于15%，包装即得抑制芦蒿土传病原菌的芦蒿秸秆分解菌剂。