发明名称 |
一种γ-谷氨酰转肽酶的制备方法 |
摘要 |
本发明提供了一种γ-谷氨酰转肽酶的制备方法。该方法将谷氨酰转肽酶表达质粒转化到大肠杆菌构建基因工程菌、对基因工程菌进行发酵、并利用IPTG或乳糖进行诱导表达的步骤,诱导表达结束前3小时,加入含L-谷氨酰胺及NAD的复配促进表达。本发明通过高密度培养含谷氨酰转肽酶的大肠杆菌工程菌,结合蛋白高效表达激活剂,表达后最佳酶活达到350000U/L。使用本发明方法可以明显的提高酶的表达量及酶活,促进底物谷氨酰胺转化为L-茶氨酸的效率,进而提高茶氨酸的生产量。同时,缩短了工艺周期,降低了生产成本,易操作,易放大,稳定性好,适于大规模工业化生产。 |
申请公布号 |
CN105219747A |
申请公布日期 |
2016.01.06 |
申请号 |
CN201510765816.8 |
申请日期 |
2015.11.11 |
申请人 |
南京师范大学 |
发明人 |
殷志敏;朱岩岩;黄正才 |
分类号 |
C12N9/10(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/10(2006.01)I |
代理机构 |
南京知识律师事务所 32207 |
代理人 |
卢亚丽 |
主权项 |
一种γ‑谷氨酰转肽酶的制备方法,包括将谷氨酰转肽酶表达质粒转化到大肠杆菌构建基因工程菌、对基因工程菌进行发酵、并利用IPTG或乳糖进行诱导表达的步骤,其特征在于:诱导表达结束前3小时,加入含L‑谷氨酰胺及NAD的复配促进表达。 |
地址 |
210097 江苏省南京市鼓楼区宁海路122号 |