一种结核分枝杆菌利福平耐药突变的检测方法及试剂盒和应用

摘要

本发明涉及一种结核分枝杆菌利福平耐药突变的检测方法及试剂盒，更具体地说，本发明涉及一种结核分枝杆菌利福平耐药突变的检测方法及试剂盒和应用。本发明还提供了设计在rpoB基因利福平耐药决定区相关区域的、具有高度的特异性的引物组。

主权项

一种用于检测结核分枝杆菌利福平耐药相关基因的待测突变位点上是否存在突变的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括：正向引物和反向引物，其中，所述正向引物和反向引物中一个引物为辨别性引物，所述辨别性引物以其3'末端碱基起算第1‑8位的任意1个或多个碱基对应待测突变位点，但与野生型或突变型序列相应区段上碱基序列完全匹配，并且所述的辨别性引物的3'末端核苷戊糖3号C的羟基是ddC；并且所述正向引物和反向引物中另一引物位于基因突变位点下游或上游且与相应区段上碱基序列完全匹配；高保真DNA聚合酶；和非高保真DNA聚合酶；其中，所述的正向引物和/或反向引物用于扩增含所述待测突变位点的扩增产物；并且所述的待测突变位点选自下组：rpoB基因的对应于rpoB蛋白中第516位氨基酸的密码子序列、第526位氨基酸密码子序列、第531位氨基酸的密码子序列、或其组合。