一种固定化的有机磷农药降解酶及其制备方法与应用

摘要

本发明提供了一种米根霉糖化酶的淀粉结合域突变体、该突变体与有机磷农药降解酶的融合酶、制备方法及其在农药废水处理中的应用。通过分析大量淀粉结合域的结合位点，获得多个结合位点突变体，结果发现突变体SBDm(S33T,F58W)具有优良的作为亲和标签结合淀粉基质的性能。将该突变体SBDm与有机磷农药降解酶(OP)融合，可一步快速将有机磷农药降解酶从发酵液中固定在淀粉基质上，而亲和标签和固定化并不影响酶活性。淀粉基质固定化后的降解酶在有机磷农药生产废水处理和其它农药残留去除方面具有很大的应用前景。

主权项

一种淀粉结合域SBD突变体，其特征在于：对淀粉结合域蛋白第33位的丝氨酸(S)和第58位的苯丙氨酸(F)独立或同时进行突变，所述突变体具有如Seq ID No.4所述的氨基酸序列，其中第33位氨基酸X1独立选自苏氨酸(T)、酪氨酸(Y)或天冬酰胺(N)，第58位氨基酸X2独立选自色氨酸(W)、蛋氨酸(M)或异亮氨酸(I)；或对Seq ID No.4所述的淀粉结合域SBD突变体在第33和58位外的氨基酸进行各种取代、添加和/或缺失一个或几个氨基酸获得的具有淀粉结合活性的衍生蛋白质。