衍生自鸡贫血病毒（ＣＡＶ）ＶＰ２蛋白质的细胞核定位信号胜肽以及它们的应用

摘要

明揭示具有细胞核定位活性并且衍生自鸡贫血病毒(CAV)VP2蛋白质之经分离的胜肽。该经分离的胜肽被证实在一选定的标的物质(诸如蛋白质、胜肽、核酸、药学活性试剂、化学物质等)的核递送上是有用且有效的。该经分离的胜肽可以藉由与一标的物质(特别是一蛋白质)形成一缀合物或者经由一能够表现一具有该经分离的胜肽与该标的蛋白质之融合蛋白质的表现匣来输送该标的物质至一哺乳动物细胞的细胞核内。

主权项

一种用于递送一标的物质至一哺乳动物细胞之细胞核内的方法，其包括将该哺乳动物细胞接触或转染以一细胞核运输系统，该细胞核运输系统能使该标的物质在该哺乳动物细胞的细胞核内展现一生物活性；其中该细胞核运输系统包含有该标的物质以及与该标的物质相缔合之一经分离的胜肽，或者该细胞核运输系统包含有一表现匣，该表现匣能够表现一包含该标的物质以及该经分离的胜肽之融合蛋白质，其中该表现匣包含有一编码该融合蛋白质的核酸建构物以及一被可操作地连结至该核酸建构物的启动子；其中该经分离的胜肽具有将该标的物质递送至该哺乳动物细胞的细胞核内的细胞核定位活性，并且具有一胺基酸序列是：(i)对应于一全长具有216个胺基酸的野生型CAV VP2蛋白质所具者，除了位在该野生型CAV VP2蛋白质的133和/或134处的胺基酸残基被替换为丙胺酸，或者位在该野生型CAV VP2蛋白质的136至138处的胺基酸残基被替换为丙胺酸，或者位在该野生型CAV VP2蛋白质的150至152处的胺基酸残基被替换为丙胺酸，或者位在该野生型CAV VP2蛋白质的136至138与150至152处的胺基酸残基被替换为丙胺酸；或(ii)对应于该野生型CAV VP2蛋白质的一C端截短的产物所具者，其中位在该野生型CAV VP2蛋白质的133至138
处的胺基酸残基在C端截短之后未改变；或(iii)对应于该野生型CAV VP2蛋白质的一N端截短的产物所具者，其中位在该野生型CAV VP2蛋白质的133至138处的胺基酸残基在N端截短之后未改变；或(iv)对应于该野生型CAV VP2蛋白质的一N端与C端截短的产物所具者，其中该野生型CAV VP2蛋白质的133至138处的胺基酸残基在N端与C端截短之后未改变；或(v)以下列式(I)来表示：Lys-Arg-Ala-X1-X2-X3-Z (I)其中：X1、X2以及X3各自独立地为一选自于丙胺酸、离胺酸以及精胺酸的胺基酸；以及Z为不存在，或者表示Leu、Leu-Asp或Leu-Asp-Tyr；以及其中该标的物质与该经分离的胜肽之缔合或融合不包括一相同于全长具有216个胺基酸的野生型CAV VP2蛋白质所具者的胺基酸序列。