一种利用整合宿主因子来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法

摘要

本发明公开了一种利用整合宿主因子来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法，其将含有脱氧核糖核甘酸，DNA聚合酶，寡核苷酸引物，以及作为模板的混合重叠寡核苷酸的反应液中加入IHF原液，按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复的循环，从而将目的核酸片段合成并且扩增。本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。

主权项

一种利用整合宿主因子来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法，其特征在于：通过如下步骤实现：S1：设计需要合成的DNA序列，得到混合重叠寡核苷酸；其中，每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸，以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基)；S2：将含有脱氧核糖核甘酸，DNA聚合酶，寡核苷酸引物，以及作为模板的上述混合重叠寡核苷酸的反应液中加入IHF原液；其中，IHF原液的浓度为102ng/μl；S3：按照常规PCR的解链，退火，延伸三个步骤进行反复的循环，将目的核酸片段合成并且扩增。