发明名称 |
一种利用非特异性结合蛋白来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种利用非特异性结合蛋白来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法,其通过如下步骤实现:S1:设计需要合成的DNA序列,得到混合重叠寡核苷酸;其中,每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸,以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基);S2:将含有脱氧核糖核甘酸,DNA聚合酶,寡核苷酸引物,以及作为模板的上述混合重叠寡核苷酸的反应液中加入HU蛋白原液;S3:按照常规PCR的解链,退火,延伸三个步骤进行反复的循环,将目的核酸片段合成并且扩增。采用上述方案后,本发明方法能够特异性地、高效地合成和扩增目标核酸序列。 |
申请公布号 |
CN105200037A |
申请公布日期 |
2015.12.30 |
申请号 |
CN201510602428.8 |
申请日期 |
2015.09.21 |
申请人 |
华侨大学 |
发明人 |
戚智青;唐黎;齐晓雪;侯丹;刁勇;吕志民;王庆波 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
泉州市文华专利代理有限公司 35205 |
代理人 |
陈智海 |
主权项 |
一种利用非特异性结合蛋白来提高基于PCR的基因合成技术灵敏度的方法,其特征在于:通过如下步骤实现:S1:设计需要合成的DNA序列,得到混合重叠寡核苷酸;其中,每个序列都有25bp的重叠寡核苷酸,以覆盖整个DNA序列(200到1500碱基);S2:将含有脱氧核糖核甘酸,DNA聚合酶,寡核苷酸引物,以及作为模板的上述混合重叠寡核苷酸的反应液中加入HU蛋白原液;其中,HU蛋白原液的浓度为130ng/μl;S3:按照常规PCR的解链,退火,延伸三个步骤进行反复的循环,将目的核酸片段合成并且扩增。 |
地址 |
362000 福建省泉州市丰泽区城东华侨大学 |