一种土壤漆酶活力的测定方法

摘要

一种用于测定土壤漆酶活力的方法，涉及土壤漆酶活力测定方法，该方法包括如下步骤：1、利用灭菌的0.9% NaCl浸提新鲜土样；2、于96微孔板上，以2,2'-联氮双二铵盐（ABTS）为底物，底物工作浓度为20-30mM；3、吸光值测定时间，每5-10分钟测定吸光值1次，1-5小时时间段，20-30分钟测定吸光值1次；4、利用一级动力学方程，拟合漆酶产物生成过程，并确定漆酶产物最大生成量时吸光值，以及生成相应的最大产物量的平均合成时间；5、计算漆酶活力。此法排除传统线性方程计算漆酶活力时，初始浓度时间段选取时的主观臆测，以及最大产物生成量难以确定的不足。本发明有利于土壤漆酶活力测定方法的统一和标准化。

主权项

一种土壤漆酶活力的测定方法，其特征在于，所述方法利用一级动力学模型，确定漆酶底物利用最大潜势和最大产物合成的平均时间，并以此为基础计算漆酶活力；利用酶产物合成动力学特征参数，从而使得漆酶活力测定过程更为标准化；包括以下过程：（1）无菌生理盐水浸提新鲜土壤样品，水土比10:1，重量比；（2）ABTS为底物，其工作浓度为20‑30mM；（3）以96孔板为底物－酶液检测载体，以酶标仪测定产物吸光值；（4）于不同底物－酶反应时间测定漆酶产物的吸光值；（5）利用非线性回归模型，计算漆酶产物的最大合成潜势，以及相应的平均合成时间；（6）利用上述最大产物合成潜势和平均合成时间，计算土壤漆酶活力。