β-内酰胺类抗生素耐药性的检测方法、系统及其应用

摘要

本发明涉及药物检测领域，特别涉及β-内酰胺类抗生素耐药性的检测方法、系统及其应用。其中，该方法包括：将待测微生物的悬浊液与β-内酰胺类抗生素的标准液混合后除去待测微生物，得到待测液；获取待测液的液相色谱图；根据液相色谱图判定待测微生物对β-内酰胺类抗生素的耐药性。由于检测过程中不受微生物浓度、纯度和操作者操作技术高低等的影响，因此灵敏度高，准确度高；检测速度快；检测时间短，仅需2小时即可完成，本发明提供的检测方法使用的微生物量少，不需多次传代培养，整个实验的时间大大减少，从而能够对临床尽早快速用药提供及时的依据，尤其是重症感染病人，而且由于检测时间大大减少，耗材成本低廉。

主权项

β‑内酰胺类抗生素耐药性的检测方法，其特征在于，包括：制备浓度为0.5‑0.6麦氏单位的待测微生物的悬浊液；将所述待测微生物的悬浊液与β‑内酰胺类抗生素的标准液按照体积比1:1‑1:2的比例混合均匀，静置20‑30分钟，得到混合液；从所述混合液中除去所述待测微生物，得到待测液；获取所述待测液的液相色谱图；若液相色谱图中包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰及其β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素耐药；若液相色谱图中包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰，但不包含其β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素敏感；所述β‑内酰胺类抗生素的标准液包括：浓度为敏感标准浓度的β‑内酰胺类抗生素标准液、浓度为中介耐药浓度的β‑内酰胺类抗生素标准液和耐药标准浓度的β‑内酰胺类抗生素标准液；所述混合液包括：所述待测微生物的悬浊液分别与所述敏感标准浓度、所述中介耐药浓度和所述耐药标准浓度的β‑内酰胺类抗生素标准液混合得到的三种混合液；所述待测液包括：将上述三种混合液分别除去所述待测微生物，得到对应敏感标准浓度的敏感待测液、对应中介耐药浓度的中介待测液、对应耐药标准浓度的耐药待测液的三种待测液；获取所述待测液的液相色谱图包括：分别获取上述三种待测液的液相色谱图；判定包括：若所述三种待测液的液相色谱图中，均包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰及其β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素耐药；若所述三种待测液的液相色谱图中，均包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰但均不包含β‑内酰胺类抗生素的β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素敏感；判定还包括：若所述三种待测液的液相色谱图中，所述敏感待测液的液相色谱图中包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰及其β‑内酰胺作用的碎片峰，而所述中介待测液和耐药待测液的液相色谱图中，均包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰但均不包含β‑内酰胺类抗生素的β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素中度敏感；若所述三种待测液的液相色谱图中，所述敏感待测液和所述中介待测液的液相色谱图中，均包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰及其β‑内酰胺作用的碎片峰，而所述耐药待测液的液相色谱图中，包含β‑内酰胺类抗生素的标志峰但不包含β‑内酰胺类抗生素的β‑内酰胺作用的碎片峰，则判定所述待测微生物对β‑内酰胺类抗生素中介耐药。