发明名称 |
一株产乙基长春胺的夹竹桃科内生真菌CH1及其应用 |
摘要 |
本发明涉及微生物技术领域,特别涉及一株产乙基长春胺夹竹桃科内生真菌及其代谢产物的应用。该内生真菌的培养及其代谢产物的提取方法主要包括如下步骤:取新鲜的夹竹桃根茎,培养发酵,进行菌株的分离,挑取少量菌丝液体发酵培养得到次级代谢产物,过滤,萃取,可得到乙基长春胺等长春胺类化合物。本发明从夹竹桃树皮中分离筛选出一株产乙基长春胺内生真菌CH1,这为产乙基长春胺提供了一种新的研究思路;提供了利用内生真菌发酵获得定向活性代谢产物的方法;为生产长春胺类生物碱开发增添了新的途径,有利于实现自动化,工业化生产。 |
申请公布号 |
CN105200091A |
申请公布日期 |
2015.12.30 |
申请号 |
CN201510096233.0 |
申请日期 |
2015.03.05 |
申请人 |
中南大学 |
发明人 |
刘佳佳;彭樱子;洪娟;殷珍珍;刘雄;任娜 |
分类号 |
C12P17/18(2006.01)I;C07D461/00(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N |
主分类号 |
C12P17/18(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一株产乙基长春胺夹竹桃科内生真菌,其特征在于:包括如下步骤:(1)菌种分离与活化:取新鲜的夹竹桃植物的皮质部:将经过预处理的植物组织在无菌条件下切成1cmx1cm小块,转接在制备好的分离培养基上,于27℃倒置培养至菌丝覆盖培养皿,待组织块周围长出菌丝后挑取尖端部分,继续接种培养。取实验室保存的夹竹桃科内生真菌菌种,在洁净工作台处操作,用接种针挑取少量菌丝,接入已灭菌的固体培养基,于27±2℃倒置培养至菌丝覆盖培养皿;培养基组成成分为;土豆:10~20%、葡萄糖:1%~5%、蔗糖1%~5%、MgSO41‰~5‰,牛肉膏1%~5%,氨基酸1‰~5‰。(2)发酵培养:取活化培养后的菌种,在无菌条件下,转接入已灭菌的液体种子培养基中,27±2℃下摇床培养,得种子发酵液;无菌条件下,按照10%的接种量接种于灭菌处理过的液体培养基中,27±2℃下间歇性震荡培养6~8天;(3)产物处理:发酵完毕,超声处理30~45min;过滤,菌液减压蒸干至100~150ml,有机溶剂萃取,菌丝干燥后粉碎,有机溶剂萃取,合并有机相,减压浓缩可得乙基长春胺、长春新碱等长春胺类化合物。 |
地址 |
410083 湖南省长沙市岳麓区麓山南路932号 |