一种纯化野生刺叶小檗中小檗碱的工艺方法

摘要

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生三颗针里提取纯化小檗碱的方法，特别是涉及一种利用生物酶解、超声波提取结合柱层析纯化技术，纯化小檗碱的新方法。其优点是：1、应用生物酶解技术，使细胞内小檗碱充分溶出。2、采用超声波提取技术，有效成分受热时间降低，活性损失少，产品生物活性高。3、硅胶柱层析和重结晶纯化技术，使有效成分小檗碱的纯度进一步提高，简单易操作，生产成本大大降低，可以工业化使用。本发明利用生物酶解技术使有效成分尽可能溶出，再用超声波提取，乙醇做溶剂，再经柱层析纯化，最后用重结晶二次纯化，将小檗碱纯度提高到98.4％。

主权项

一种利用生物酶解藕联超声波强化提取，再结合柱层析纯化小檗碱的方法，其步骤如下：(1)酶解：三颗针粉碎后，采用复合纤维素酶，在40‑50℃下酶解，保温沉淀1‑3h；(2)超声提取：加入乙醇超声波提取，超声频率50‑80KHZ，料液比1:8‑10，超声时间50‑80min，薄层层析检测分析，回收乙醇，得粗提液；(3)得粗粉：将所获初提物用乙醇加热溶解，用酸调其pH值为2.0～2.5，静置、过滤、并用水洗涤至中性，浓缩干燥得盐酸小檗碱粗提粉；(4)硅胶柱层析:将所得粗粉溶于热乙醇加适量硅胶搅拌，烘干过60‑80目筛，干法上样，上200‑300目硅胶柱层析；(5)洗脱：用乙酸乙酯‑乙醇溶液以一定比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集小檗碱各阶段洗脱液；(6)浓缩：回收乙醇，将盐酸小檗碱各阶段洗脱液浓缩，得含量为80％以上的盐酸小檗碱粉末；(7)重结晶：取小檗碱粉按一定的量加乙醇，加热溶解，浓缩到原体积的十分之一，放置过夜，析出结晶，过滤，分离晶体；将剩余物用如上方法加热溶解，重结晶，如此反复两次，得到精制的纯度在98％以上的小檗碱成品。