一种北沙参多糖中单糖组成的测定方法

摘要

本发明提供了一种北沙参多糖中单糖组成的测定方法，本发明采用GC-MS/SIM法对北沙参粗多糖和均一多糖中的单糖组成进行测定，对目标化合物的特征碎片离子进行检测，排除了杂质干扰，即使目标化合物与杂质未达到完全色谱分离也可进行检测，大大提高了检测的选择性、灵敏度和信噪比。

主权项

一种北沙参多糖中单糖组成的测定方法，其特征在于，具体方法如下：气质联用仪条件色谱条件：色谱柱为30 m×0.25 um×0.25 mm岛津Rxi‑5MS石英毛细管柱；进样口温度250℃，分流比：99:1，程序升温：初始温度160℃，1℃·min^‑1以后升到195℃，保持15 min，5℃·min^‑1升到230℃，保持10 min；氦气作载气，流速1 mL·min^‑1，进样量1 µL，吹扫流量6 mL·min^‑1；质谱条件：EI源，电子轰击能量70 ev；检测器增益：0.7kv，离子源温度：200℃；辅助接口温度：280℃；扫描方式：选择SIM离子监测；供试品溶液制备精密称取多糖样品10mg，加入2mol/L的三氟乙酸6 mL,充氮气后密封，100℃水解4h，氮气吹干，加入甲醇1mL，氮气吹干，重复5次，即得多糖水解产物；将水解样品用P₂O₅真空干燥12h，加入10 mg盐酸羟胺、0.6 mL吡啶及4 mg肌醇，90℃水浴反应1h，取出后放冷至室温，加入1.6 mL醋酸酐，90℃继续反应1h，吡啶定容至5.0mL，即得；对照品储备液的制备精密称取对应各单糖对照品10 mg，P₂O₅真空干燥12h，加入10 mg盐酸羟胺、0.6 mL吡啶及4 mg肌醇，90℃水浴反应1h，取出后放冷至室温，加入1.6 mL醋酸酐，90℃继续反应1h，吡啶定容至5.0mL，即得；测定法取供试品和对照品溶液各1 μL，注入气质联用仪，从标准曲线上计算出供试品溶液中各个单糖的量，除以摩尔质量计算得到物质的量。