鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法

摘要

本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，包括(1)菌种复苏；(2)筛选对抗生素敏感性差异的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌；(3)以一定的时间间隔或不同的稀释浓度将鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌接种至培养基进行混合培养；(4)测定步骤(2)中抗生素对筛选出的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的最小抑菌浓度：(5)制备抗生素板培养基；(6)分离混合培养菌液。该鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，在鸭禽体外使两种菌能够共同生长20代以上，为探讨二者在共生条件下的耐药性转移及相关机制提供了条件，对养鸭业的疾病防治具有重要的意义。

主权项

鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌混合培养及重新分离的方法，其特征是：包括如下步骤：(1)菌种复苏：将冻干保存的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌菌种分别接种于对应的培养基中，进行菌种复苏，制得复苏后的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌；(2)筛选对抗生素敏感性差异的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌：对步骤(1)得到的复苏后的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌，采用药物敏感性试验筛选出对某种抗生素敏感性差异的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌；(3)混合培养：将步骤(2)筛选出的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌接种于培养基中，即可对鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌进行混合培养9‑12h，并制得混合培养菌液；(4)测定步骤(2)中所选用抗生素对步骤(2)筛选出的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的最小抑菌浓度：(5)制备抗生素板培养基：选取介于步骤(4)中测定的所选用抗生素对鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌的最小抑菌浓度之间的抗生素浓度，制备抗生素平板培养基，备用；(6)分离混合培养菌液：将步骤(3)制得的混合培养菌液进行稀释后，采用涂布平板法，在步骤(5)制得的抗生素平板培养基中对稀释菌液中的鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌进行培养20‑24h，即可对鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌进行分离。