| 主权项 |
一种蛋白质样品结晶筛选方法，其特征在于：该筛选方法采用玻璃材质的筛选器；所述筛选器包括相互贴合的下底板(2)和上转板(1)，上转板(1)呈圆形，可绕圆心作包括指定三个角度的旋转，在下底板(2)的上贴合面上开设各种开口向下的凹槽流道、微腔，在上转板(1)的下贴合面上开设各种开口向上的凹槽流道、微腔，以及一些进、出口通孔，所述的凹槽流道、微腔可由化学蚀刻方式开设，且均为微米级；所述上转板(1)旋转三个角度之一，起始点凹槽(17)位置：所述下底板(2)和上转板(1)上开设的凹槽流道、微腔，以圆心为中心，呈幅射状排列L个形状相同的扇形单元(3)，每个扇形单元由中心向周边分割为M个径向小单元(4)，每个径向小单元(4)又由N个微单元(5)组成；所述扇形单元(3)的左右两侧分别开设从圆心向圆周走向的蛋白质进样通道(14)和从圆周至圆心的沉淀剂进样通道(7)；所述通道俯视呈首尾相接的S字形，分别有与周向方向一致M×N个横式的蛋白质微腔(6)和沉淀剂微腔(13)，每对蛋白质微腔(6)和沉淀剂微腔(13)位于同一直径处，交替在微腔左右两侧有与径向方向一致的引入流道；将蛋白质样品进样口(8)设于圆心处，将蛋白质样品出样口(9)设于圆周边；另一侧通道的沉淀剂进样口(10)设于圆周边，沉淀剂出样口(11)位于圆心处；两个进口和两个出口均位于上转板(1)且为通孔；当一侧通道的微腔位于下底板(2)上，则该微腔两侧的引入流道位于上转板(1)上，在该位置上、下板上的凹槽相互流通；此时，另一侧通道的微腔位于上转板(1)上，该微腔两侧的引入流道位于下底板(2)上，上、下板上的凹槽也相互流通，构成蛋白质进样通道(14)和沉淀剂进样通道(7)；每个扇形单元中的蛋白质微腔(6)随所处位置半径增大体积不变，但径向宽度变小、弧长变长；各径向小单元(4)的沉淀剂微腔(13)随所处位置半径增大按一定关系变大；所述上转板(1)旋转三个角度之二，继续旋转进入滑动控制点凹槽Ⅰ(18)：所述扇形单元两侧通道的微腔与引入流道错位，凹槽相互阻断，此时，各组的蛋白质微腔(6)和沉淀剂微腔(13)在弧长上有部分重合形成密闭的结晶反应腔；在此位置，选择部分相邻两个结晶反应腔为一组，在该组两结晶反应腔之间的下底板(2)上开设径向的蛋白质浓度调节通道(15)，所述蛋白质浓度调节通道(15)径向两端与两结晶反应腔之间留有h距离，相邻两结晶反应腔位于上转板(1)的微腔，在位于蛋白质浓度调节通道(15)的旋转上游位置各相向伸出一段衔接流道，衔接流道的长度大于等于h，在位于两衔接流道之间开设蛋白质浓度调节孔(12)，该孔为通孔，通孔外表备有密封盖；所述上转板(1)旋转三个角度之三，继续旋转进入滑动控制点凹槽Ⅱ(19)：两衔接流道与蛋白质浓度调节通道(15)径向接通，所述蛋白质浓度调节孔(12)位于蛋白质浓度调节通道(15)的上方；其筛选方法为：(A)、将上转板旋转至起始点凹槽位置，固定下底板和上转板，形成蛋白质样品溶液引入通路和沉淀剂溶液引入通路；向蛋白质样品进样口注入蛋白质样品溶液，向沉淀剂进样口注入沉淀剂溶液，使得各通路充满溶液；(B)、将上转板旋转至起凹槽Ⅰ位置，固定下底板和上转板，微腔与引入流道错位，储存蛋白质样品的微腔与储存沉淀剂的微腔相连，形成若干个适合结晶的密闭反应腔，反应腔内进行结晶反应；(C)、确认反应腔中是否有结晶出现，如出现结晶，则筛选结果完成；如步骤(B)中的某个反应腔中出现沉淀或具有多个微小的晶体，需重新结晶，继续转动上转板；(D)、将上转板旋转至起凹槽Ⅱ位置，固定下底板和上转板，蛋白质样品浓度调节孔、蛋白质样品浓度调节通道与结晶反应腔接通；向蛋白质样品浓度调节孔中加入超纯水，以密封盖密封蛋白质样品浓度调节孔，超纯水扩散至结晶反应腔中，沉淀或微晶体全部溶解；(E)、将上转板旋转至起凹槽Ⅰ位置，固定下底板和上转板，使结晶反应腔与蛋白质样品浓度调节通道分离，结晶反应腔再次呈密闭状态，结晶反应腔中进行结晶反应；(F)、确认反应腔中是否有结晶出现，如出现结晶，则筛选结果完成；如步骤(E)中的某个反应腔中出现沉淀或具有多个微小的晶体，需重新结晶，重复步骤(D)和(F)。 |
