一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法

摘要

本发明提供了一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，采用酱油渣为主要原料，将新鲜酱油渣60℃恒温干燥，粉碎过60目筛，石油醚脱脂后，加入纯水，放于微波-超声波协同萃取仪中，调节pH4.5，间歇萃取时间为500s；再加入木瓜蛋白酶，进行酶解，并加热灭酶活后，再加入纤维素酶，进行酶解，对酶解液抽滤，滤液旋转蒸发得浓缩液，加入95%乙醇进行醇沉，然后对沉淀进行低温冷冻干燥，制得可溶性膳食纤维。本发明提取工艺简单，集中了微波-超声波协同提取效率高、产品纯度高，可操作性强，同时结合了生物酶的高效活性等优点，提取时间短，具有广阔的推广应用前景。

主权项

一种酶法辅助微波‑超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，其特征在于：主要原料为酱油渣，其制备方法按如下步骤进行：步骤1）预处理：将新鲜酱油渣放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60 ℃，恒温干燥，当含水率低于1.5%时，放入手提式粉碎机中，粉碎5 min后，过60目筛，得到酱油干渣；步骤2）酱渣脱脂：向步骤1）中的酱油干渣加入石油醚，以每克酱油干渣加入5 mL石油醚计，混合均匀，封胶封口12小时后，用移液枪移除石油醚，重复1‑3次，剩余部分放通风处自然干燥，制得脱脂后的酱油渣；步骤3）微波‑超声波协同萃取：向经过步骤2）处理的酱油渣中加入纯水，按以每克酱油渣加入15 mL纯水计，混合均匀；并加入0.1 mol/L盐酸溶液，调节pH到4.5，置于微波‑超声波协同萃取仪中，超声波常开条件下即600 W，微波功率50 W，间歇萃取时间为500 s，进行萃取；步骤4）酶解：将萃取之后的酱油渣与纯水的混合液，利用0.1 mol/L的盐酸将pH调至5.0‑7.0后，加入木瓜蛋白酶，以100mL混合液加入木瓜蛋白酶0.5‑2.5g计，在55‑75 ℃酶解40 mim‑80 min后，加热至160 ℃恒温3 min将酶灭活；再利用0.1 mol/L的盐酸将溶液pH调至3.5‑5.5后，加入纤维素酶，以100mL混合液加入1‑4g纤维素酶计，在30‑50 ℃酶解30 mim‑70 min后，再加热至160 ℃恒温3 min将酶灭活，抽滤后得到酶解液；步骤5）旋蒸：将步骤4）所得的酶解液，置于旋转蒸发仪上，进行旋转蒸发，条件设定为温度70 ℃、转速50 r/min，旋转蒸发得到浓缩液，浓缩液体积为旋转蒸发前酶解液体积的1/5；步骤6）醇沉：向步骤5）所得的浓缩液中，加入95%乙醇进行醇沉，其体积比为，浓缩液：95%乙醇=1：4，混合均匀，过夜放置18 h，第二天将醇沉溶液放于离心管中，并放入离心机，以4000 r/min的转速离心5 min，弃上清液，再加入纯水溶解后，再以4000 r/min的转速离心5 min，再次弃去上清液，制得醇沉沉淀物；步骤7）将步骤6）醇沉沉淀物放入冷冻干燥机中，冷冻干燥，即得到可溶性膳食纤维。