发明名称 |
一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法 |
摘要 |
本发明涉及生物分析技术领域,一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法,步骤如下:(1)设计3’端偶联荧光染料的DNA,形成荧光探针;(2)设计若干与步骤(1)所述DNA片段具有不同数量不匹配碱基的互补DNA;(3)分别将若干互补DNA与荧光探针在毛细管内杂交,经荧光检测,计算峰面积比(S<sub>1</sub>/S<sub>Total</sub>),得到峰面积比与不匹配碱基数的标准曲线,待测样品与荧光探针毛细管内杂交后,计算其电泳峰面积比,对照标准曲线确定待测样品的不匹配碱基数。本发明提供的毛细管内快速检测不匹配碱基数的方法,操作简单,可重复性高,能方便快捷的检测出样品中不匹配碱基数量,进一步拓展了DNA荧光探针在生物分析领域的应用。 |
申请公布号 |
CN105181778A |
申请公布日期 |
2015.12.23 |
申请号 |
CN201510559851.4 |
申请日期 |
2015.09.06 |
申请人 |
常州大学 |
发明人 |
王建浩;秦玉琴;滕一万;陈瑶;李进晨;蒋鹏举;邱琳;王车礼;杨丽;张晨澄;樊杰;柳丽 |
分类号 |
G01N27/447(2006.01)I |
主分类号 |
G01N27/447(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法,其特征在于:(1)设计3’端偶联荧光染料的DNA,形成荧光探针;(2)设计若干与步骤(1)所述DNA片段具有不同数量不匹配碱基的互补DNA;(3)分别将若干互补DNA与荧光探针在毛细管内杂交,经荧光检测,计算峰面积比(S<sub>1</sub>/S<sub>Total</sub>)(其中,S<sub>1</sub>为荧光探针峰面积,S<sub>Total</sub>为所有峰面积),得到峰面积比与不匹配碱基数的标准曲线,待测样品与荧光探针毛细管内杂交后,计算其电泳峰面积比(S<sub>1</sub>/S<sub>Total</sub>),对照标准曲线确定待测样品的不匹配碱基数。 |
地址 |
213164 江苏省常州市武进区滆湖路1号 |