一种敲除argCJBD提高重组枯草芽孢杆菌乙酰氨基葡萄糖产量的方法

摘要

本发明公开了一种敲除argCJBD提高重组枯草芽孢杆菌乙酰氨基葡萄糖产量的方法，属于遗传工程领域。本发明是以重组枯草芽孢杆菌BSGN6-P_xylA-glmS-P₄₃-GNA1作为出发菌株，通过同源重组敲除乙酰谷氨酸半醛脱氢酶编码基因(argC)、鸟氨酸乙酰转移酶编码基因(argJ)、乙酰谷氨酸激酶编码基因(argB)和乙酰鸟氨酸转氨酶编码基因(argD)，阻断了宿主菌由谷氨酸生成精氨酸的途径，促进谷氨酸转化为谷氨酰胺的反应，而谷氨酰胺是乙酰氨基葡萄糖合成的氨基供体，从而提高乙酰氨基葡萄糖的产量。在使用半合成培养基的摇瓶发酵过程中，敲除argCJBD的重组枯草芽孢杆菌乙酰氨基葡萄糖的产量达到6.4g/L，比敲除前提高16.3％。为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产氨基葡萄糖奠定了基础。

主权项

一种高产乙酰氨基葡萄糖的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，以枯草芽孢杆菌BSGN6‑P_xylA‑glmS‑P₄₃‑GNA1为出发菌株，敲除了乙酰谷氨酸半醛脱氢酶的编码基因argC、鸟氨酸乙酰转移酶的编码基因argJ、乙酰谷氨酸激酶的编码基因argB和乙酰鸟氨酸转氨酶的编码基因argD。