PROTOCOL FOR IDENTIFYING AND ISOLATING ANTIGEN-SPECIFIC B CELLS AND PRODUCING ANTIBODIES TO DESIRED ANTIGENS

摘要

항원-특이적 항체 분비 및 항체 형성 세포, 예컨대 항원-특이적 B 세포를 확인하는 방법, 및 이 세포에 의해 생성된 항체의 항원-특이적 항체 서열을 클로닝하는 방법이 제공된다. 특히, 상기 방법은 항원-특이적 B 세포에 대해 B 세포를 농후화하는 단계, 항원-특이적 B 세포를 배양하여 클론성 B 세포 집단을 생성하는 단계, 단일 항원-특이적 항체를 생성하는 클론성 B 세포를 검출하는 단계, 임의로 기능적 활성에 대해 클론성 B 세포 집단을 스크리닝하는 단계, 세포를 염색하고 분류하여 항원-특이적 B 세포를 단리하는 단계, 항원-특이적 항체 서열을 코딩하는 핵산을 서열분석하는 단계, 서열을 발현시켜 항체를 생성하는 단계, 항체를 단리하는 단계 및 항원 인식에 대해 항체를 스크리닝하는 단계를 포함한다. 상기 방법은 항원-특이적 항체 분비 및 항체 형성 세포의 농후화 및 선택의 개선을 제공하고, 이것은 항원-특이적 항체의 회수를 증대시킨다.