特异性结合西布曲明及去甲基西布曲明的单克隆抗体的制备

摘要

特异性结合西布曲明及去甲基西布曲明的单克隆抗体的制备，包括免疫抗原合成、检测抗原合成、免疫小鼠、单克隆抗体筛选、单克隆抗体结构特异性鉴定，免疫抗原合成为：①按照葡萄糖和乳糖与牛血清白蛋白的摩尔比都为20-25∶1混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃摇床反应2小时；②修饰化牛血清白蛋白、戊二醛、去甲基西布曲明以1∶(25-30)∶(80-90)的摩尔比混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，pH7.2-7.4、0.01M PBS溶液中4℃充分透析；检测抗原合成为：卵清蛋白、戊二醛、甲基西布曲明西布曲明以1∶(15-20)∶(60-75)的摩尔比例混合，pH调至9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，pH7.2-7.4、0.01M PBS溶液中4℃充分透析，本发明灵敏度高、特异性强、方便快捷、操作简单、成本低廉，无需借助昂贵的设备。

主权项

1、特异性结合西布曲明及去甲基西布曲明的单克隆抗体的制备，包括人工免疫抗原的合成、人工检测抗原的合成、免疫小鼠、单克隆抗体的筛选、单克隆抗体的结构特异性鉴定，其特征是人工免疫抗原的合成为：①糖基化BSA的制备：按照葡萄糖和乳糖与牛血清白蛋白的摩尔比例都为20-25∶1混合，调节pH到9.0-9.5，在40-42℃摇床反应2小时；②把修饰化牛血清白蛋白、戊二醛、去甲基西布曲明以1∶(25-30)∶(80-90)的摩尔比例混合，调节pH到9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，然后在pH7.2-7.4、0.01M PBS溶液中4℃充分透析；人工检测抗原的合成为：把卵清蛋白、戊二醛、甲基西布曲明西布曲明以1∶(15-20)∶(60-75)的摩尔比例混合，调节pH到9.0-9.5，40-42℃反应6-8小时，然后在pH7.2-7.4，0.01M PBS溶液中4℃充分透析。