金磁微粒用于纯化回收琼脂糖凝胶中DNA的方法

摘要

本发明涉及一种金磁微粒用于纯化回收琼脂糖凝胶中DNA的方法，该方法包括电泳、切胶、溶胶、杂交、清洗、洗脱。解决了现有纯化回收琼脂糖凝胶中DNA方法需要用有机溶剂萃取或需多次离心，步骤复杂，不易实现高通量自动化纯化，且价格昂贵的技术问题。该方法不需用有机溶剂萃取，不需离心，步骤简单，易实现高通量自动化，价格低廉。

主权项

1、金磁微粒用于纯化回收琼脂糖凝胶中DNA的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)电泳DNA样品用质量浓度为0.3～2％的琼脂糖凝胶在TAE或TBE缓冲液下电泳；(2)切胶电泳完成后，在紫外灯下切胶，将含有DNA条带的胶块称重，放入干净的EP管中；(3)溶胶按照1毫克＝1微升换算，量取体积为3倍胶块重量的摩尔浓度为3～5M的GuSCN加入EP管中，50℃水浴10分钟，期间上下颠倒数次；(4)杂交水浴完成后，按照1毫克＝1微升换算，在EP管中加入体积为4倍胶块重量的质量浓度为19％～22％的PEG8000，再加入300～800μg金磁微粒，混匀，静置2～5分钟；(5)清洗将EP管放入磁性分离架中磁分离，弃上清，得到磁粒，用200～800μl体积浓度为70％的乙醇清洗2次，空气中放置2～3分钟；(6)洗脱向EP管加入20～50μl TE缓冲液，50℃水浴3分钟或在室温下静置5分钟洗脱，磁分离，所得清液即为回收到的DNA溶液。