发明名称 区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段序列和一个酶切位点
摘要 本发明涉及一种区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段序列和一个酶切位点,融合反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和限制性内切酶分析(RFLP)两种分子生物学检测方法,选择CDV NP基因,设计特异引物扩增829bp,再利用BamHI RFLP处理该片段,经琼脂糖凝胶电泳判定,通过片段的数目鉴别动物体内检测到的犬瘟热病毒属于接种的疫苗株还是感染了野毒,电泳得到675bp和153bp 2条片段为疫苗株,得到455bp、220bp和153bp 3条片段为野毒株。有效区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株,为毛皮动物的养殖提供兽医技术保证。
申请公布号 CN101376909A 申请公布日期 2009.03.04
申请号 CN200710056023.4 申请日期 2007.08.31
申请人 中国农业科学院特产研究所 发明人 王凤雪;闫喜军;吴威;柴秀丽;张海玲;罗国良;邵西群
分类号 C12Q1/68(2006.01) 主分类号 C12Q1/68(2006.01)
代理机构 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 代理人 王薇
主权项 1、区分犬瘟热病毒疫苗株和野毒株的一段序列和一个酶切位点,其特征在于:在CDV犬瘟热结构蛋白核蛋白NP基因的372-1200位之间,设计引物P1:5‘TTCTG AGGCA GATGA GTTCT TC 3’,P2:5‘CTTGGATGCT ATTTC TGACA CT 3’RT-PCR扩增特异性片段829bp,PCR扩增的目的片段可以被特异核酸位点BamHI切成2个或者3个片段,从而鉴别犬瘟热病毒疫苗株和野毒株。
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