利用高速逆流色谱法纯化一枝蒿酮酸和金腰素乙的方法

摘要

本发明涉及一种利用高速逆流色谱法纯化一枝蒿酮酸和金腰素乙的方法，该方法是将分离溶剂系统置于分液漏斗中充分振摇后静置分层，取上相作为固定相，下相作为流动相，取一枝蒿提取物溶解于上相和下相的混合溶液中，再将固定相用泵灌满色谱分离柱，然后将柱的首端与进样阀相接，待流动相开始流出色谱柱时，收集分离物，将不同成分分别收集、浓缩、干燥，分离得到95％以上的酮酸和金腰素乙的单体化合物。

主权项

1、一种利用高速逆流色谱法纯化一枝蒿酮酸和金腰素乙的方法其特征在于按下列步骤进行：a、取一枝蒿全草，粉碎后用70％乙醇回流提取，合并提取液减压浓缩成浸膏，用水混悬，分别用石油醚和乙酸乙酯萃取；b、萃取液浓缩至干，得乙酸乙酯部分干燥粉末，将粉末溶于二氯甲烷，超声溶解，过滤，合并，浓缩得粗样品；c、采用高速逆流色谱仪，色谱仪分离溶剂系统由正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水组成，其体积比为2-5∶4-6∶2-5∶4-6；d、将溶剂系统配置于分液漏斗中，充分振摇后静置分层，取上相作为固定相，下相作为流动相，取步骤b提取粗样品溶于上层和下层的混合溶剂中，使高速逆流色谱仪柱子中充满固定相，然后使其主机转动，再将流动相泵入柱，再由进样阀进入粗样品溶于上层和下层的混合溶剂，根据检测器谱图接收目标成分；e、将高速逆流色谱分离得到的样品利用高效液相检测，色谱条件为：C18 column，4.6mmI.D.×250mm，5μm；柱温35℃，流动相：A甲醇；B 0.2％甲酸；梯度洗脱程序：0-40min，A∶B＝30∶70-70∶30，v/v，60min时，A∶B＝70∶30，v/v，流速：1.0ml min-1，检测波长：245nm。