快速检测水溶液中半胱氨酸的方法

摘要

本发明提供了一种快速检测水溶液中半胱氨酸的方法。该方法基于二价铜Cu²⁺离子、以二甲酚橙为显色剂在pH为6.0的缓冲溶液中直接定性定量地检测半胱氨酸的含量，检测过程简单，判别直观方便，易于普及推广应用。该方法测量结果准确，灵敏度高，而且不受其它氨基酸、阴离子的干扰，可以推广应用于临床血样、尿样以及食品中半胱氨酸的测定。

主权项

1、一种快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)、配制pH5.5-6.5浓度1-100mM的HEPES缓冲溶液，并配制2×10-3M的Cu2+溶液、2×10-3M的二甲酚橙溶液；(2)、把2ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取2×10-3M的二甲酚橙溶液25μl，加到上述比色皿中，此时溶液由无色变黄，在紫外可见分光光度仪上检测，441nm有最大吸收；(3)、在步骤(2)的比色皿中，加入与二甲酚橙等量的Cu2+溶液，此时溶液由黄变紫红，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的441nm变为572nm；(4)、取半胱氨酸水溶液，逐渐用微量进样器加到步骤(3)比色皿中，边加样边在紫外可见分光光度仪上检测，随着半胱氨酸水溶液的加入，最大吸收峰又由572nm逐渐向441nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫红变回黄色，此时441nm吸收峰达到最大值，停止加半胱氨酸水溶液，此时加入半胱氨酸水溶液体积计为V半胱氨酸μl；(5)、按[Cu2+]×4×25μl/V半胱氨酸μl计算出半胱氨酸的含量。