| 主权项 |
1.一种用于连续分离和聚焦混合物中各成分的方法，此方法包括：1)通过按顺序布置的f个区建立一个用于层析聚焦的F单元；所述f个区按从F(f)到F(1)的顺序标记，f是大于4的整数，F(f)区被定义为上游端，F(1)区被定义为下游端，每个区均有一个层析柱进液端接口和层析柱出液端接口，在两接口之间可拆卸地连接一层析柱；该层析柱采用离子交换相，亲合相，螯合相，手性相，配位体交换相，分子筛相，棒状色谱柱，聚合体相，正相，反相或其它任何层析固定相填充；层析柱进液端接口与注入管相连，层析柱出液端接口与排出管相连；每个注入管和排出管均有一个分支开口，某一区注入管上的分支开口与上游相邻区排出管上的分支开口相连形成两个相邻区之间的液流通路；F(f)区注入管上的分支开口和F(1)区排出管上的分支开口可以阻断或取消，以保证洗脱液从F(f)区的注入管进入F单元并从F(1)区的排出管流出F单元；2)在F单元中选定至少4个注入管和至少2个排出管用于液体的注入和收集，并且至少有一个液流通路上的注入管和排出管被同时选定；封闭未选定的注入管和排出管，为每个选定的注入管和排出管制定液体的组成和流速，以形成一个连续的解吸梯度，此梯度是离子强度梯度、亲酯性梯度、PH梯度、螯合梯度、氢键梯度、亲合梯度、手性梯度或其它任何层析梯度；所述的未被选定的注入管和排出管不含分支开口，而由这些注入管和排出管连接形成相邻区间的液流通路；3)在F单元中进行层析聚焦a)用泵通过选定的注入管和排出管，以设定的流速和组成连续并同时的注入和排出下列组成成份的液体：从F(f)区的注入管注入高解吸强度的洗脱液；从至少一个选定的注入管注入样品液；从剩余选定的注入管注入低解吸强度的聚焦液；聚焦液从某一区的注入管注入并在分支开口处与相邻的上游区洗脱下来的洗脱液混合，构成一个解吸强度较低的洗脱液用于此区的洗脱，在F单元中，产生一个从F(f)区到F(1)区的解吸强度由高到低的解吸梯度，在F单元的各区中有至少4个解吸强度水平；从F(1)区的排出管收集洗出液，从余下的选定的排出管以小于洗脱液流速50％的流速收集馏分；b)周期性的重置F(f)区中的层析柱到F(1)区，并同时重置其余层析柱至紧相邻的上游区来进行连续层析聚焦，样品中的各成分被注入到下游的某个区中，吸附在这一区的层析柱中，随着层析柱的重置一个区一个区的向上游移动，由于不同区中解吸强度的差异，各成分选择性的从不同区中解吸下来，从而彼此分离，从某一区解吸下来的成分被洗脱回到相邻的下游区，在那里被重新吸附于含有新注入样品的层析柱上，此成分由于下一次的层析柱重置被再次通过前述的那一区，且由于连续地上样和层析柱的反复重置而被保留并累积在这一区和它相邻的下游区之间。 |
