象草的快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种象草的快速繁殖方法，属于植物细胞工程技术领域。以象草幼穗为材料，通过愈伤组织诱导、丛生苗诱导以及丛生苗增殖和壮根培养，进行象草细胞工程苗的快速扩繁；1个幼穗1次扩繁可产生细胞工程苗85～406株，平均细胞工程苗繁殖系数为198株/穗，细胞工程苗温室或大田苗床移栽成活率达98％，经30d以上的生长，可作为种苗用于大田种植；本方法能改进已建立的“象草体细胞培养植株再生方法”不能诱导丛生苗的不足，是现有象草种茎无性扩繁和种茎细胞工程扩繁技术的有益补充，具有繁殖系数高、取材方便和操作简便的特点，为象草产业化应用提供技术支撑。

主权项

象草的快速繁殖方法，其特征在于，(1)外植体的选择与灭菌选用象草的幼穗为外植体，在无菌条件下用70％的酒精彻底擦拭包在幼穗外部的叶鞘和茎，剥出幼穗，切成2～3mm长的片段；(2)幼穗愈伤组织诱导把幼穗的切段接种于下列培养基中：改良的MS+4.0mg/L 2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D+0.05mg/L激动素KT+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5g/L活性碳，pH值为5.8；培养室温度为26℃～28℃，光强1500～2000Lx，光照时间为16小时/天，培养时间为35～40d；其中改良的MS指的是MS中铁盐含量加倍；(3)丛生苗诱导将幼穗诱导的颗粒状愈伤组织培养于下列培养基中：改良的MS+3～4mg/L 6-苄基腺嘌呤6-BA或3～4mg/L KT+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5g/L活性碳，pH值为5.8；培养室温度为26℃～28℃，光强2500～3000Lx，光照时间为16小时/天，培养时间为30～35d；(4)丛生苗增殖和壮根培养将丛生苗中具有3张完整叶的分蘖在无菌条件切割分离后，分别接种于下列培养基中：MS+3～4mg/L 6-BA或3～4mg/L KT+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5g/L活性碳，pH值为5.8；培养室温度为26℃～28℃，光强3500～45000Lx，光照时间为16小时/天，培养时间为25～30d；(5)细胞工程苗的苗床移栽将培养苗移栽至温室或大田苗床，环境温度控制在25～35℃；做畦，畦长自定，畦宽1～1.5米，行株距为20～25cm×10～15cm，移栽时浇透水，7d内保持土壤湿润，14～20d时，可施用尿素2～3kg/666.7m2，施肥后雍根，并把尿素埋入土中，生长超过30d，可作为种苗进行大田移栽。