利用细胞间期核染色中心数鉴定杨树多倍体的方法

摘要

本发明公开了一种利用细胞间期核染色中心数鉴定杨树多倍体植株的方法，属于植物遗传育种领域。该方法包括以下步骤：采集待鉴别的杨树植株的幼嫩生长部位，依次进行固定，解离，水洗，染色，常规压片；观察统计间期细胞核内的染色中心数目；如果所鉴定杨树植株的间期细胞核的染色中心数目大于40，则该植株为三倍体等多倍体植株。本发明方法适合于具有分生组织细胞分裂不旺盛、所含细胞中期分裂相较少、染色体计数困难等特性的杨树实验材料的多倍体鉴定，还适于对杨树多倍体植株进行快速鉴定。本发明方法省却了预处理等制片技术环节，节约了制片与鉴定时间，对于实验材料细胞分裂相、制片技术以及显微观察仪器等要求不高，易于掌握和实施。

主权项

一种利用细胞间期核染色中心数鉴定杨树三倍体的方法，包括以下步骤：采集待鉴别的杨树植株的幼嫩生长部位，依次进行固定，解离，水洗，染色，常规压片；其中，所述的固定用卡诺固定液在4℃温度下固定2小时以上，所述的卡诺固定液由乙酸和乙醇按照1∶3的体积比组成；所述的解离是用解离液解离25～30分钟，所述的解离液由浓盐酸和乙醇按照1∶1的体积比组成；所述的染色为用改良卡宝品红进行染色，所述的改良卡宝品红的配制方法为：(1)制备A液：取3克碱性品红定溶100ml的70％酒精中；(2)制备B液：取A液10ml，加入5％苯酚水溶液90ml；(3)制备C液：取B液55ml，加入37％甲醛6ml、冰醋酸6ml；(4)：取C液10ml，加入45％醋酸90ml以及山梨醇1克，放置两周，即得；观察统计间期细胞核内的染色中心数目；如果所鉴定杨树植株的间期细胞核的染色中心数目大于40，则所鉴定杨树植株为三倍体植株。