基于珠母贝外套膜分泌物的珍珠质基质蛋白及其制备方法

摘要

基于珠母贝外套膜分泌物的珍珠质基质蛋白及其制备方法，该珍珠质基质蛋白有以下方法制得：将珠母贝外套膜的中心部分从贝体上分离，得到外套膜原料；将外套膜原料放入PBS溶液，低温下浸泡后，将得到的溶液离心分离，收集上清液，得到外套膜分泌液；将该外套膜分泌液超滤和透析除盐浓缩，得到浓缩液；将此浓缩液冷冻干燥，制得总的珍珠质基质蛋白，或，先制得总的珍珠质基质蛋白，然后，对其进行离子交换柱层析，收集280nm下有吸收峰的蛋白组分，再将该蛋白组分进行高效液相分离，收集280nm下有吸收峰的单一蛋白组分，将该单一蛋白组分干燥，制得单一珍珠质基质蛋白。本发明珍珠质基质蛋白无需经过脱钙处理，具有很高的生物活性。

主权项

一种基于珠母贝外套膜分泌物的珍珠质基质蛋白，其特征在于，该珍珠质基质蛋白采用以下步骤制备得到：步骤1：将珠母贝外套膜的边缘深色带与中心部分分离，然后，将外套膜的中心部分从珠母贝的贝体上分离，得到外套膜原料；步骤2：将步骤1中得到的外套膜原料放入PBS溶液中浸泡，在0℃～4℃的低温下，浸泡3小时～6小时，将得到的溶液以15000转每分钟的转速进行离心分离，收集离心分离的上清液，得到外套膜分泌液；步骤3：将步骤2得到的外套膜分泌液进行超滤和透析除盐浓缩，得到浓缩液；步骤4：将步骤3得到的浓缩液进行冷冻干燥，制得总的珍珠质基质蛋白，或，先将步骤3得到的浓缩液进行冷冻干燥，制得总的珍珠质基质蛋白，然后，对该总的珍珠质基质蛋白进行离子交换柱层析，收集280nm下有吸收峰的蛋白组分，采用十二烷基磺酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳分析收集的蛋白组分，再将该蛋白组分进行高效液相分离，并收集280nm下有吸收峰的单一蛋白组分，之后，将该单一蛋白组分进行冷冻干燥，制得单一珍珠质基质蛋白。