X染色体MiniSTR荧光复合扩增试剂盒及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种X染色体MiniSTR分型试剂盒及其制备方法和应用。本发明设计了四对公共引物对，优选了适合群体遗传分布的12个X染色体STR基因座并对部分基因座设计了MiniSTR引物，在上述MiniSTR引物的5′端分别加上这四对公共引物得到24条加尾引物；采用本发明试剂盒可在一个单管同时扩增12个X染色体STR基因座，结合常染色体、Y染色体和线粒体的遗传标记，可有效解决缺少双亲的姐妹认亲、同父异母的半同胞姐妹认亲、隔代认亲等特殊DNA检案，同时还能实现对低至0.05ng/20μl的DNA模板成功检测，本发明试剂盒具有高灵敏度、对DNA高度降解的检材高检出率、制备成本低等优点。

主权项

一种X染色体Mini STR荧光复合扩增试剂盒，该试剂盒用于检测DXS101、HPRTB、DXS6789、DXS6800、DXS6801、DXS6809、DXS7132、DXS7424、DXS8377、DXS8378、DXS9898和DXS10011共12个X-STR基因座，包括彼此独立包装的扩增试剂和检测试剂，所述的扩增试剂包括引物混合物，DNA聚合酶，PCR反应缓冲液；所述的检测试剂包括内标和等位基因分型标准物Ladder；其特征在于：所述的引物混合物由五条公共引物和24条加尾引物混合而成；所述的五条公共引物序列分别为SEQ ID NO：1、SEQ IDNO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示，其中，在SEQ ID NO：2、SEQID NO：3、SEQID NO：4和SEQ ID NO：5的5′端分别加上颜色互不相同的荧光标记物；所述的24条加尾引物的序列分别为SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、SEQID NO：9、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：16、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：19、SEQ IDNO：20、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：29所示。