一种能包装重组逆转录病毒粒子的细胞系及其制备方法

摘要

本发明公开了一种能包装重组逆转录病毒粒子的细胞系的制备方法，将报告基因克隆到载体pDON-AI-2Neo上，与质粒pGp和pE-Ampho共转染至293T细胞。收集培养上清，感染293细胞，用新霉素筛选得到细胞系HEKGFP。将质粒pE-Ampho和pPUR共转染至细胞系HEKGFP中，用嘌呤霉素筛选，得到细胞系HEKGFPEam.。将质粒pGp和pSV-2共转染至细胞系HEKGFPEam.中，用潮霉素筛选，得到细胞系HEKGFPEam.GPw。本发明的制备方法提供了一种能产生高滴度病毒的细胞系，此细胞系产生的重组病毒可感染多数哺乳动物细胞。

主权项

1、一种能包装重组逆转录病毒粒子的细胞系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)构建报告细胞系HEKGFP；(2)构建包装细胞系HEKGFPEam.；(3)构建能包装重组逆转录病毒粒子的细胞系HEKGFPEam.GPw。