罗丹明123人工抗原合成、抗体制备方法及应用

摘要

本发明属于抗原、抗体的制备方法，专用于非食用色素罗丹明B特异性识别、及研制罗丹明B的速测免疫试剂盒。包括罗丹明B人工抗原合成及其抗体的制备方法，主要以罗丹明123代替罗丹明B合成免疫抗原和包被抗原，并将免疫抗原注射到新西兰大白兔体内，制备出高效价的罗丹明B抗体，该抗体稳定性好，效价高，为罗丹明B酶联免疫试剂盒的研制解决了技术难点，该方法实用性强，抗原抗体制备过程无需高价值设备，可操作性强，适于大规模生产。

主权项

罗丹明123人工抗原合成方法，其特征包括如下工艺步骤：精确称取20‑30mg罗丹明123溶于400μL甲醇；精确称取200‑250mg牛血清白蛋白溶于5mL0.1mol/L，pH7.4磷酸盐缓冲液中；将罗丹明123甲醇溶液缓慢滴加到牛血清蛋白液中，同样加入3mL25％(V∶V)戊二醛水溶液，混匀，室温静置1小时，4℃冰箱过夜；装入透析袋，4℃下、pH＝7.4的0.01mol/L的磷酸盐缓冲液中透析5天，然后精确量取蛋白质偶联物溶液的体积，测定浓度和结合比，加入1/1000叠氮钠，4℃保存。