一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法

摘要

本发明涉及生物细胞提取及应用领域，提供一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法，包括以下步骤：首先无菌条件下脂肪源抽取，然后通过缓冲液浸泡、冲洗，再采用营养液水浴振荡消化，所得消化物过筛后取过滤液进行离心处理，获其基质微管层，沉淀部分除去红细胞，然后再离心处理后用营养液离心洗涤，将消化分离出的细胞用生理盐水稀释；接着将电泳槽用尼龙筛布均匀横向分为三格，按一定体积比置入氯化钾及葡萄糖酸钙溶液，交流电持续输入2～5分钟，然后将上述所得细胞溶液置入中间格电泳槽搅匀，直流电电泳15～30分钟，抽取正电极侧电泳槽内细胞液，即得脂肪间充质干细胞。该方法周期短，不会造成DNA双旋链上的基因排序紊乱或突变。

主权项

一种分离、纯化及提取脂肪间充质干细胞的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：a、脂肪源抽取、分离、纯化无菌条件下脂肪源抽取，然后通过缓冲液浸泡、冲洗，再采用含0.1％I型胶原酶的无血清DMEM营养液水浴振荡消化，所得消化物过筛后取过滤液进行离心处理，获其基质微管层，沉淀部分除去红细胞，然后再离心处理后用含0.1％I型胶原酶的无血清DMEM营养液离心洗涤，将消化分离出的细胞用生理盐水稀释；b、间充质干细胞电泳、提取将电泳槽用尼龙筛布均匀横向分为三格，按一定体积比置入氯化钾及葡萄糖酸钙溶液，交流电持续输入2～5分钟，然后将上述所得细胞溶液置入中间格电泳槽搅匀，直流电电泳15～30分钟，抽取正电极侧电泳槽内细胞液，即得脂肪间充质干细胞。